雨生血球藻高濃度培養(yǎng)及其產(chǎn)蝦青素的研究.pdf

1、蝦青素具有很強(qiáng)的抗氧化性和清除自由基的能力,可有效地防止組織、細(xì)胞和DNA被氧化損傷,具有廣泛的應(yīng)用。雨生血球藻是目前公認(rèn)的蝦青素的最好生物來源。本文以實(shí)驗(yàn)室保藏的一株雨生血球藻為出發(fā)藻株,通過兩輪紫外誘變,在添加有機(jī)碳源的培養(yǎng)基上篩選出一株適合混合營養(yǎng)的高生物量、高蝦青素產(chǎn)量藻株ZW-Ⅱ-6。藻生物量由0.1877 g/L提高到0.3176g/L,提高了約69.2％,蝦青素產(chǎn)量由2.0835 mg/L提高到了5.2706mg/L,約提

2、高了1.405倍。經(jīng)傳代培養(yǎng),其生物量及蝦青素產(chǎn)量穩(wěn)定,說定誘變獲得的藻株ZW-Ⅱ-6性狀能穩(wěn)定遺傳。
　　 實(shí)驗(yàn)以干重法測定雨生血球藻的生物量,以藻生物量為指標(biāo),優(yōu)化了誘變藻株ZW-Ⅱ-6的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。分別添加乙酸鈉和葡萄糖進(jìn)行混合營養(yǎng)培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中添加葡萄糖所獲得的藻生物量更大。因此選擇葡萄糖作為誘變藻株的有機(jī)碳源。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),確定其生長的最佳培養(yǎng)基為:葡萄糖3 g/L,KNO30.6 g/

3、L,KH2PO40.03 g/L,MgSO4·7H2O0.2g/L,CaCl20.04 g/L。對與雨生血球藻生長關(guān)系密切的環(huán)境條件光照、溫度、pH分別進(jìn)行了研究,得出雨生血球藻最適生長的光照強(qiáng)度為25001x,溫度為22℃,初始pH為8。在最適培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件下培養(yǎng)8d雨生血球藻的生物量達(dá)到1.1274 g/L。
　　 探討了添加有機(jī)碳源進(jìn)行自養(yǎng)及混合營養(yǎng)培養(yǎng)情況下,有機(jī)碳源和光照強(qiáng)度對雨生血球藻生長的影響。發(fā)現(xiàn)光強(qiáng)度對雨生血

4、球藻的光合自養(yǎng)和光合異養(yǎng)生長都有明顯影響,最適光強(qiáng)為25001x,有機(jī)碳源葡萄糖更利于藻株ZW-Ⅱ-6的生長。光照和葡萄糖添加量對雨生血球藻的生長是相互影響的,在光照為0及光照為5001x左右時(shí),葡萄糖添加量為5g/L時(shí),雨生血球藻獲得最大生物量。而光照上升到25001x時(shí),獲得最大雨生血球藻生物量時(shí)的葡萄糖添加濃度降為3g/L。通過中心組合實(shí)驗(yàn)得出,葡萄糖添加量為3.1113g/L,光照強(qiáng)度為22591x,雨生血球藻產(chǎn)量最高為1.23

5、75g/L。
　　 采用二甲基亞砜提取法測定蝦青素的產(chǎn)量,研究混合營養(yǎng)條件下產(chǎn)蝦青素情況。光照強(qiáng)度和葡萄糖添加濃度對雨生血球藻的蝦青素產(chǎn)量具有交互影響,光照為0時(shí),添加葡萄糖培養(yǎng)時(shí)的蝦青素產(chǎn)量小于對照,在添加不同濃度葡萄糖的培養(yǎng)基中,葡萄糖添加5g/L時(shí)的蝦青素產(chǎn)量最高,當(dāng)光照上升到25001x,獲得最高蝦青素產(chǎn)量的葡萄糖濃度降為3g/L。通過中心組合實(shí)驗(yàn)得出,蝦青素產(chǎn)量最高的條件為:葡萄糖添加濃度3.1616 g/L,光照強(qiáng)度