不同品種鴨AdipoR1基因表達(dá)規(guī)律及調(diào)控機(jī)制的研究.pdf

1、AdipoR1基因是骨骼肌中表達(dá)豐度最高且與球狀脂聯(lián)素親和力最強(qiáng)的細(xì)胞因子，主要介導(dǎo)球狀脂聯(lián)素參與糖類(lèi)和脂質(zhì)代謝，維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)，與體內(nèi)脂肪累積呈負(fù)相關(guān)，與胰島素抗性、抗動(dòng)脈粥樣硬化等免疫反應(yīng)直接或間接相關(guān)。AdipoR1基因在組織中表達(dá)的高低直接決定脂聯(lián)素基因在相關(guān)組織中發(fā)揮生理功能的作用強(qiáng)度。miRNAs是一類(lèi)來(lái)源于染色體非編碼區(qū)大小為20nt左右的小RNA分子，其作用是在轉(zhuǎn)錄后水平上對(duì)靶基因的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控，主要是抑制靶基因的表達(dá)。m

2、iRNAs在動(dòng)物的基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞增殖和分化、細(xì)胞凋亡、機(jī)體癌癥防御等過(guò)程中發(fā)揮著重要的生理學(xué)功能。miRNAs尤其作為一種重要的轉(zhuǎn)錄后調(diào)解新陳代謝因子，參與機(jī)體能量的動(dòng)態(tài)平衡，調(diào)節(jié)脂肪的分化。AdipoR1基因在鴨的各個(gè)組織中表達(dá)譜還未見(jiàn)詳細(xì)報(bào)道，鑒于AdipoR1介導(dǎo)的脂聯(lián)素與體脂累積呈負(fù)相關(guān)，在治療肥胖的臨床醫(yī)學(xué)上有著十分中的意義，由此我們?cè)O(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)AdipoR1基因在鴨的組織表達(dá)譜和時(shí)空表達(dá)譜，同時(shí)探討miR

3、-148a對(duì)鴨AdipoR1的調(diào)控作用。旨在為鴨的選育和脂肪累積的調(diào)控機(jī)理研究提供參考信息。
　　采用Real-Time PCR法，以β-actin為內(nèi)參，檢測(cè)AdipoR1基因在10周齡連城白鴨、金陵白鴨、櫻桃谷鴨和莆田黑鴨4個(gè)品種鴨胸肌、腿肌、腎等8個(gè)組織中的表達(dá)譜，及在胸肌、腿肌和肝臟中2、4、6、8、10周齡的時(shí)空表達(dá)譜。主要結(jié)果如下:
　　1.AdipoR1基因在四個(gè)品種鴨胸肌組織不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)量波動(dòng)很大，但基本

4、上都呈波浪式的變化。4周齡和8周齡時(shí)表達(dá)量顯著高于其他點(diǎn)的(P＜0.05)。10周齡時(shí)表達(dá)量均顯著或極顯著地低于8周齡的，此時(shí)連城白鴨的降幅最小，表達(dá)量顯著高于其他三個(gè)品種鴨的（P＜0.05）。
　　2.AdipoR1基因在四種不同品種鴨腿肌組織中的表達(dá)規(guī)律一致。早期表達(dá)量都很低，隨著腿部肌肉的快速增長(zhǎng)，4周齡時(shí)AdipoR1基因表達(dá)累積量迅速升高，并極顯著地高于其他各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的(P＜0.01)，其中櫻桃谷鴨的表達(dá)量最高，是金陵白

5、鴨的22倍，連城白鴨的10倍。后期表達(dá)趨于水平，并持續(xù)在較低的豐度。2、6、8、10周齡時(shí)，金陵白鴨腿肌中的表達(dá)量均介于兩親本連城白鴨和櫻桃谷鴨的中間水平，正體現(xiàn)了雜種優(yōu)勢(shì)。
　　3.AdipoR1基因在四個(gè)品種鴨肝臟組織中表達(dá)規(guī)律并不一致，具有品種差異性。金陵白鴨和櫻桃谷鴨的表達(dá)規(guī)律基本一致，前期表達(dá)量較低，后期出現(xiàn)累積量的上揚(yáng);連城白鴨和莆田黑鴨的表達(dá)量波動(dòng)較大，趨勢(shì)迥異。連城白鴨是低起點(diǎn)累積，多以高累積量出現(xiàn)，4周齡時(shí)表達(dá)量

6、最高;而莆田黑鴨是高起點(diǎn)，10周齡時(shí)表達(dá)量最高，且極顯著高于其他三個(gè)品種鴨10周齡的(P＜0.01)。
　　4.AdipoR1基因在10周齡大小四個(gè)品種鴨腺胃、腎、肌胃、腸、肝臟、胸肌、腿肌和心肌8個(gè)組織中的表達(dá)譜一致。心肌、腸和肌胃中的表達(dá)很微量，腿肌中的表達(dá)量與肝臟、腺胃和腎的無(wú)顯著差異，胸肌組織中表達(dá)量最高，是其他組織表達(dá)量的上百倍甚至上千倍。
　　運(yùn)用套式PCR技術(shù)，克隆了鴨AdipoR1基因的3'UTR片段，大小為