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1、本研究包括兩部分:1、不同精/粗比日糧對瘤胃上皮生長的影響2、不同精/粗比日糧對瓣胃上皮的影響。
一、不同精/粗比日糧對山羊瘤胃上皮生長的影響9只青年山羊隨機(jī)分為高精/粗比組(H,n=3)、中精/粗比組(M,n=3)、低精/粗比組(L,n=3)。L、M、H組日糧精/粗比例分別為10∶90,35∶65,60∶40。連續(xù)飼喂21 d后屠宰取瘤胃和瓣胃樣品。采用氣相色譜法測定揮發(fā)性脂肪酸濃度;流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞周期;半定量RT-
2、PCR測定細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)和細(xì)胞周期依賴性激酶4(CDK4) mRNA表達(dá);組織切片技術(shù)觀察前胃上皮形態(tài);生化分析技術(shù)測定蘋果酸脫氫酶活性。測定結(jié)果顯示:1)高精/粗比(60∶40)組和中精/粗比(35∶65)組瘤胃液pH顯著低于低精/粗比(10∶90)組,相反瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸和丁酸濃度顯著高于低精/粗比(10∶90)組。流式細(xì)胞術(shù)分析顯示高精/粗比(60∶40)組G0/G1期細(xì)胞百分比顯著低于低精/粗比(10
3、∶90)組(P<0.05),而S+G2/M期比例顯著高于低精/粗比(10∶90)組,提示高精/粗比(60∶40)日糧加快了細(xì)胞周期進(jìn)程;細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白D1 mRNA表達(dá)水平升高(P<0.05),提供了高精/粗比日糧加快細(xì)胞周期G1期進(jìn)程的證據(jù)。2)組織切片統(tǒng)計分析顯示:高精/粗比(60∶40)組瘤胃上皮乳頭角質(zhì)層脫落現(xiàn)象明顯,同時其厚度、細(xì)胞層數(shù)顯著低于低精/粗比(10∶90)組(P<0.05);此外,高精/粗比(60∶40)組瘤胃上
4、皮基底層細(xì)胞數(shù)量顯著高于低精/粗比(10∶90)組,提示高精/粗比(60∶40)組日糧促進(jìn)基底層細(xì)胞分裂,引起細(xì)胞數(shù)量增多。以上結(jié)果表明,高精/粗比(60∶40)日糧不僅增加山羊瘤胃上皮基底層細(xì)胞數(shù)量,同時加快角質(zhì)層細(xì)胞脫落。蘋果酸脫氫酶測定結(jié)果表明高精/粗比日糧顯著增強(qiáng)瘤胃上皮能量代謝。3)目視觀察及測量顯示:中精/粗比(35∶65)組瘤胃上皮乳頭的長度、單位面積內(nèi)(1cm2)乳頭個數(shù)以及乳頭表面積均顯著高于高精/粗比(60∶40)組
5、(P<0.05),提示中精/粗比(35∶65)日糧更有助于增加瘤胃上皮乳頭吸收面積。
二、不同精/粗比日糧對山羊瓣胃上皮生長的影響試驗(yàn)動物及飼喂方法同試驗(yàn)一,低精/粗比(10∶90)組瓣胃上皮角質(zhì)層細(xì)胞層厚度顯著高于高精/粗比(60∶40)組(P<0.05);并且棘突顆粒層細(xì)胞層數(shù)以及單位面積內(nèi)細(xì)胞數(shù)量均顯著高于高精/粗比(60∶40)組(P<0.05),這與瘤胃上皮形態(tài)學(xué)的結(jié)果相反;以上結(jié)果提示低精/粗比(10∶90)日
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