不同精粗比日糧對延邊黃牛消化發(fā)酵和瘤胃微生物多樣性的影響.pdf

1、本研究包括兩個部分，分別用于研究不同精粗比日糧對育肥前期延邊黃牛消化代謝和瘤胃微生物多樣性的影響。
　　實驗一：研究飼喂不同精粗比日糧對延邊黃牛養(yǎng)分表觀消化率、瘤胃發(fā)酵的影響。選擇4頭年齡、體重相近（300±15）kg的安裝有永久性瘤胃瘺管的延邊黃牛，采用4×4拉丁方設計，分別飼喂精粗比為30:70、40:60、60:40和70:30的育肥前期基礎日糧。試驗分為4個階段，每階段20d，其中預試期15d，正試期5d收集樣品。結果表明

2、：1）干物質(zhì)、有機物和粗蛋白采食量隨著日糧精料水平的提高而線性增加（P<0.01），而中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維采食量隨日糧精料水平的提高而線性降低（P<0.01）；隨著精粗比的提高，干物質(zhì)表觀消化率顯著升高（P<0.05），粗蛋白表觀消化率顯著降低（P<0.05）。有機物、酸性洗滌纖維表觀消化率隨著日糧精料水平的提高差異不顯著（P>0.05）。2）瘤胃pH，60:40組顯著低于其他組（P<0.05），且瘤胃平均 pH隨著精粗比的提高顯

3、著降低（P=0.01）；瘤胃氨態(tài)氮濃度，70:30組顯著高于其他組（P<0.05），瘤胃總揮發(fā)性脂肪酸濃度各組間差異顯著（P<0.05）；乙酸濃度6h時，各組間差異顯著（P<0.01），隨著精粗比的提高呈線性降低的趨勢（P<0.01）。丙酸濃度，各組間差異顯著（P<0.05），隨著精粗比的提高呈線性降低的趨勢（P=0.10）。6h時乙酸/丙酸差異顯著（P<0.05）?？傕堰恃苌锱懦隽亢湍蚰宜赜须S著精粗比的提高呈線升高的趨勢（P<0.0

4、5或P<0.01）。由此可知，提高日糧精料比例能增加實驗牛干物質(zhì)、有機物和粗蛋白采食量，中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維采食量則相應減少；有效提高了干物質(zhì)表觀消化率；降低了瘤胃平均pH，提高了瘤胃氨態(tài)氮濃度，增加了瘤胃可利用氮含量。
　　實驗二：研究飼喂不同精粗比日糧對育肥前期延邊黃牛瘤胃微生物多樣性的影響。選用3頭健康的年齡、體重相近（300±15）kg的安裝有永久性瘤胃瘺管的延邊黃牛，采用3×4拉丁方設計，分別飼喂精粗比為30:70

5、、40:60、60:40和70：30的育肥前期基礎日糧。試驗分為4個階段，每階段18d，其中預試期15d，正試期3d收集瘤胃液樣品。利用凍融法獲得瘤胃微生物基因組DNA，通過PCR獲得細菌16srDNA V3片段，并進行變性梯度凝膠電泳（Denaturing gradient gel electrophoresis）。通過對 DGGE圖譜的分析，比較各處理組間細菌種群的豐富度和相似性。通過熒光定量PCR，比較各處理組間對應微生物的相對表

6、達量。結果表明：1）瘤胃微生物的群落結構，圖譜主要分為兩大簇，將中精料水平處理組（4:6、6:4）與高(7:3)、低精料水平(3:7)處理組區(qū)分開來，條帶的相似度僅為45％。說明日糧精粗比對瘤胃微生物的群落結構有一定影響，但低精料水平日糧組（3:7）和高精料水平日糧組（7:3）的微生物群落結構差異不大。2）與精粗比3:7日糧相比，4:6、6:4和7:3處理組的條帶數(shù)減少了,各處理組間差異顯著(P<0.05)。香農(nóng)多樣性指數(shù)3:7組與6:

7、4組和7:3組差異顯著(P<0.05)。6:4組與7:3組差異顯著(P<0.05)。3:7組和4:6組差異不顯著(P>0.05)。3）溶纖維丁酸弧菌（B. fibrisolvens）的相對表達量個處理組間差異顯著（P<0.05）。與精粗比3:7相比，溶纖維丁酸弧菌的相對表達量分別降低了0.2，0.33和0.29倍。總細菌，白色瘤胃球菌（Ruminobacteralbus）和黃色瘤胃球菌（Ruminococcus flavefaciens

8、）的相對表達量各個處理組間差異不顯著（P>0.05）。與精粗比3:7相比，產(chǎn)甲烷菌mcr-A的相對表達量分別提高了0.2,0.78和0.74倍（P<0.05）。說明了，日糧精粗比對瘤胃微生物的群落結構和多樣性有較大的影響。日糧精粗比的提高降低了延邊黃牛瘤胃中溶纖維丁酸弧菌（B. fibrisolvens）的相對表達量，提高了產(chǎn)甲烷菌 mcr-A的相對表達量。而對總細菌、白色瘤胃球菌（Ruminobacter albus）和黃色瘤胃球菌（