抗稻瘟病基因Pigm共分離的分子標(biāo)記研究及雜交材料的分析.pdf

1、稻瘟病是由子囊菌Magnaporthegrisea(}tebert)Barr引起的，該病廣泛分布于世界水稻種植區(qū)域，是對(duì)水稻生產(chǎn)最具毀滅性的病害之一。實(shí)踐證明，利用分子標(biāo)記與傳統(tǒng)雜交育種相結(jié)合將單個(gè)或多個(gè)抗病基因轉(zhuǎn)移到高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)水稻中是防治稻瘟病經(jīng)濟(jì)、有效和安全的措施。
　　 水稻稻瘟病主效顯性基因Pigm為廣譜抗性基因，其抗譜明顯強(qiáng)于廣譜抗性基因Pi1、Pi2、Pi3、Pi9等，在抗病育種中具有更高的應(yīng)用價(jià)值。本研究利用Pigm

2、的供體親本谷梅4號(hào)、95個(gè)水稻親本及一些雜交材料，開(kāi)發(fā)與Pigm共分離的分子標(biāo)記，對(duì)加速抗源篩選，抗病基因的鑒定和分子標(biāo)記輔助育種具有重大意義。另外，本研究試圖分析Pigm與Pita在聚合后的純合體材料中各自的表達(dá)量。主要研究結(jié)果如下：
　　 (1)根據(jù)Pigm定位標(biāo)記在互聯(lián)網(wǎng)上查找它們?cè)谒疚锢韴D譜上的位置，在它們所在的區(qū)域附近找到22個(gè)已定位于該區(qū)段的SSR標(biāo)記。在22個(gè)SSR標(biāo)記中，僅有RM276和RM3724兩個(gè)標(biāo)記在谷

3、梅4號(hào)和多個(gè)親本間具有多態(tài)性。RM3724較RM276與Pigm距離較近，因此利用RM3724在谷梅4號(hào)和95個(gè)親本間檢測(cè)多態(tài)性，結(jié)果表明，僅有R527、R624共2個(gè)親本材料與谷梅四號(hào)具有多態(tài)性。且RM3724進(jìn)行MAS選擇的準(zhǔn)確率僅為80％，表明RM3724為非共分離的分子標(biāo)記。
　　 (2)根據(jù)谷梅4測(cè)序的結(jié)果以及秈稻9311的shot-gun序列、粳稻日本晴AP005659序列和Pigm等位的同源性很高的Pi2序列比對(duì)的

4、結(jié)果，根據(jù)插入缺失區(qū)域序列總共設(shè)計(jì)了40對(duì)InDe1引物，其中結(jié)合S29742、S1408、S2997、S2723這4對(duì)引物可以將谷梅4號(hào)和其它95個(gè)親本完全分開(kāi)。利用這些InDel標(biāo)記對(duì)谷梅4號(hào)的雜交組合的F2群體進(jìn)行分子輔助選擇，并結(jié)合田間的抗性表現(xiàn)來(lái)判斷MAS選擇的準(zhǔn)確性。分子檢測(cè)和田間鑒定的結(jié)果均表明，標(biāo)記S29742、S1408、S2997、S2723分子檢測(cè)的結(jié)果和田間抗性鑒定的結(jié)果是完全一致的，MAS選擇的效率高達(dá)100％