谷氨酰胺對(duì)生長(zhǎng)豬健康狀況的影響研究及FUT1基因多態(tài)性分析.pdf

1、本研究選用杜長(zhǎng)大三元雜為試驗(yàn)材料，就不同添加量的谷氨酰胺對(duì)杜長(zhǎng)大生長(zhǎng)性能、免疫性能、豬瘟和口蹄疫抗體水平、腸道形態(tài)發(fā)育的影響進(jìn)行比較分析，并進(jìn)行杜長(zhǎng)大三元雜抗病基因FUT1多態(tài)性分析，旨在揭示杜長(zhǎng)大不同谷氨酰胺水平下的抗病力差異的免疫學(xué)機(jī)理，為利用免疫指標(biāo)進(jìn)行免疫營(yíng)養(yǎng)的研究奠定基礎(chǔ)，確定谷氨酰胺的最佳添加劑量;為健康養(yǎng)豬從營(yíng)養(yǎng)免疫角度來(lái)尋找更健康、更安全的飼養(yǎng)管理方法和抗生素替代思路提供依據(jù)。本試驗(yàn)研究分為四個(gè)部分。
　　 第一

2、部分:谷氨酰胺對(duì)杜長(zhǎng)大生長(zhǎng)性能與免疫性能影響的研究。選擇29±2日齡生長(zhǎng)發(fā)育良好的杜長(zhǎng)大保育豬270頭，將試驗(yàn)豬隨機(jī)分為5個(gè)組，每個(gè)組3個(gè)重復(fù)（欄），每個(gè)重復(fù)18頭豬，公母比例接近，基礎(chǔ)日糧為乳二料。試驗(yàn)1～3組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.5％、1.0％、1.5％的Gln，試驗(yàn)4組在基礎(chǔ)日糧中添加400 g/t的阿莫西林，試驗(yàn)5組為對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧。試驗(yàn)期為90天。試驗(yàn)結(jié)果表明:(1)生長(zhǎng)性能:谷氨酰胺及抗生素對(duì)29d～75d階段的生長(zhǎng)

3、性能影響差異不顯著(P＞0.05)，但對(duì)76d～93d階段的平均日增重、平均日采食量、料重比影響差異極顯著(P＜0.01)，Gln最佳添加量為1.0％。(2)生理指標(biāo):添加1.0％Gln能提高紅細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞壓積、血小板等生理指標(biāo)。0.5％Gln能顯著增加白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞數(shù)(P＜0.05)，極顯著增加淋巴細(xì)胞比率(P＜0.01)。(3)生化指標(biāo):谷氨酰胺及抗生素對(duì)杜長(zhǎng)大天門(mén)冬氨酸轉(zhuǎn)移酶、ALT/GOT、堿性磷酸酶、膽固醇、高密度脂蛋

4、白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇的影響差異不顯著(P＞0.05)，而對(duì)尿素氮、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、空腹血糖的影響差異極顯著(P＜0.05)。(4)免疫指標(biāo):谷氨酰胺及抗生素對(duì)總蛋白、球蛋白、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A的影響差異不顯著(P＞0.05)，但對(duì)白蛋白、白/球比值、免疫球蛋白G、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4的影響差異顯著(P＜0.05)?；A(chǔ)日糧+1.0％Gln組總蛋白、白蛋白、白球比和補(bǔ)體C3最高。(5)抗氧化指標(biāo):Gln可顯著降低血清中MDA的含

5、量(P＜0.05)，MDA含量、SOD活力、GSH-PX活力與Gln的添加量呈負(fù)相關(guān)，Gln每增加0.5％，MDA含量減少1.72％～3.89％。提高T-AOC上，1.0％Gln是最佳添加量。(6)酶免指標(biāo):谷氨酰胺可顯著提高IL-12含量(P＜0.05)，以1.0％Gln最佳，能極顯著提高IFN-γ和CD8含量(P＜0.01)，分別以1.0％Gln和0.5％Gln的添加量最佳，能提高CD4/CD8比值，以0.5％Gln效果較好。(7)

6、免疫器官指數(shù):谷氨酰胺能提高免疫器官指數(shù)，尤其扁桃體指數(shù)顯著高于阿莫西林組20.75％(P＜0.05)，扁桃體重極顯著高于阿莫西林組35.29％(P＜0.01)。Gln的最佳添加量為1.0％，能有效替代抗生素。
　　 第二部分:谷氨酰胺對(duì)杜長(zhǎng)大豬瘟、口蹄疫抗體水平及變化趨勢(shì)的影響研究。試驗(yàn)設(shè)計(jì)同第一部分。各組在40日齡、63日齡分別進(jìn)行豬瘟疫苗首免和二免，首免后第7d、15d、22d，二免后第7d、14d、21d、28d前腔靜脈

7、采血，用于豬瘟抗體檢測(cè)。在48日齡時(shí)，免疫口蹄疫疫苗，之后第7d、15d、22d、29d前腔靜脈采血，用于豬口蹄疫病毒O型(FMDV-O)抗體檢測(cè)。結(jié)果表明，豬瘟首免2、3周后，抗生素組豬瘟抗體水平，出現(xiàn)迅速下滑趨勢(shì)，而0.5％Gln組和1.5％Gln組則出現(xiàn)上升趨勢(shì)，最高達(dá)到0.713，且豬瘟二免后，Gln組OD值差異顯著(P＜0.05)。二免第3周，1.5％Gln組豬瘟抗體水平達(dá)最高峰且上升幅度最大，高于抗生素組22.2％?？谔阋呙?/p>

8、疫第3周抗體水平到達(dá)最高峰，以0.5％Gln組效果最好。谷氨酰胺能正面影響豬瘟抗體、口蹄疫抗體的產(chǎn)生與維持時(shí)間。
　　 第三部分:研究谷氨酰胺對(duì)杜長(zhǎng)大小腸形態(tài)學(xué)發(fā)育程度的影響。試驗(yàn)設(shè)計(jì)同第一部分。在試驗(yàn)結(jié)束后，每組每重復(fù)選1頭健康豬只屠宰，采集十二指腸、空腸和回腸腸段樣本，用于形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果表明，基礎(chǔ)日糧中添加Gln能顯著改善小腸形態(tài)學(xué)發(fā)育程度(P＜0.05)。1.5％Gln組對(duì)提高十二指腸的絨毛長(zhǎng)度、絨毛寬度能達(dá)到顯著水平(

9、P＜0.05);0.5％Gln組對(duì)降低空腸的隱窩深度能達(dá)到顯著水平(P＜0.05)，各Gln組隱窩深度隨Gln添加量的增多呈線性下降趨勢(shì)。1.0％Gln組能增加回腸絨毛長(zhǎng)度，1.5％ Gln能降低回腸的隱窩深度。說(shuō)明Gln能有效改善抗生素對(duì)小腸形態(tài)學(xué)發(fā)育的損傷或抑制作用，取代抗生素。
　　 第四部分:杜長(zhǎng)大三元雜FUT1基因多態(tài)性分析。本研究應(yīng)用PCR和PCR-RFLPs技術(shù)檢測(cè)并分析杜長(zhǎng)大78個(gè)樣品的抗病基因(FUT1)多態(tài)性