重樓屬的基因多樣性與基因芯片鑒別研究.pdf

1、藥用植物基因多樣性即遺傳多樣性，是指蘊(yùn)藏在植物個(gè)體基因里的所有遺傳信息的總和，包括一個(gè)群體內(nèi)不同個(gè)體或種內(nèi)不同群體之間的遺傳變異。全面準(zhǔn)確地了解藥用植物基因多樣性，將能探明其進(jìn)化的歷史，有助于資源開發(fā)、物種保護(hù)及種資源保護(hù)。
　　 傳統(tǒng)中藥多是復(fù)方制劑，成分多樣且作用機(jī)制復(fù)雜，這給藥物研究帶來很大的困難。而基因芯片技術(shù)具有大規(guī)模、高通量、平行檢測等優(yōu)勢，是從基因?qū)用鎭龛b別植物，不會(huì)受植物不同取樣部位、不同取樣時(shí)間以及不同前處理過

2、程與方式的影響，結(jié)果穩(wěn)定，重復(fù)性好。
　　 重樓屬植物是極具藥用價(jià)值的植物，但長期以來其野生資源被過度采集，在許多地區(qū)已瀕臨滅絕，因此開展其物種分子水平的研究很有必要。本研究測定了壺瓶山8種重樓屬樣品rbcL基因、atpB基因和18SrDNA基因序列，比較了該3個(gè)基因的差異，構(gòu)建了基于這3個(gè)基因序列的遺傳進(jìn)化樹，分析它們的同源性關(guān)系，對(duì)其屬下分類及親緣關(guān)系進(jìn)行了描述，探討重樓屬植物的基因多樣性。
　　 利用現(xiàn)有藥用植物基

3、因資源篩選其特異性片段制作探針。然后用接觸式點(diǎn)樣法構(gòu)建用于藥用植物分析的基因芯片，優(yōu)化了芯片雜交的關(guān)鍵技術(shù)，探索最優(yōu)雜交溫度為55℃。用基因芯片檢測了10種藥用植物:長春花、銀杏、青蒿、文縣黃耆、杜仲、黃連、野薄荷、紅豆杉、華中雪蓮、黃芩。長春花的功能基因最豐富，進(jìn)而富含大量的次生代謝產(chǎn)物如黃酮、生物堿、萜類等。最后將植物群落基因組芯片鑒別了凌云重樓和壺瓶山重樓，結(jié)果表明凌云重樓比壺瓶山重樓功能基因豐富，有效成分含量更高，更具有藥用價(jià)值