分子標記在水稻分子育種中的有關應用.pdf

1、為了加強分子標記在現(xiàn)代水稻分子育種上的應用,我們進行了SSR標記檢測雜交稻組合種子純度、分子標記輔助選擇Bt抗蟲基因育種及分子標記輔助選擇抗褐飛虱基因育種,主要結果如下:
　　一、SSR標記具有數(shù)量豐富、多態(tài)性高、遺傳上呈共顯性、實驗操作簡單、結果穩(wěn)定可靠、引物序列易交流等優(yōu)點,已成為雜交水稻純度鑒定的一種理想分子標記。通過篩選分布于水稻12條染色體上的600個SSR標記進行多態(tài)性分析。用吐溫法快速提取DNA,利用RM3、RM30

2、4和RM475等標記鑒別參與研究的21個雜交稻組合及其17個親本,對雜交稻種子的純度進行了鑒定,獲得了令人滿意的結果。
　　二、通過傳統(tǒng)雜交的方法將華中農(nóng)大的三個Bt明恢63中的Bt基因cry1C*、cry2A*和cry1Ac/Ab,轉育到水稻品種秀水123、湘晴及節(jié)水抗旱稻恢復系旱恢3號和保持系滬旱1B中,以獲得新型轉Bt基因家系。以自交系BC2F3代水稻葉片為材料,利用分子標記輔助選擇、田間除草劑篩選或者試紙條檢測方法,以獲得

3、新型轉Bt基因家系。并在全生育期實行除不噴施農(nóng)藥外的正常田間管理的轉基因植株的田間抗蟲鑒定方法篩選出抗蟲性良好、農(nóng)藝性狀優(yōu)良的家系,為后續(xù)抗蟲育種提供材料。BC2F3代PCR檢測及試紙條檢測的結果顯示分別獲得cry1C*和cry2A*基因的滬旱1B、秀水123和湘晴的純合家系。同時,在田間自然誘發(fā)蟲害條件下,轉基因株系對稻縱卷葉螟蟲表現(xiàn)出強抗性。
　　三、稻褐飛虱是水稻生產(chǎn)中的主要害蟲之一,褐飛虱的爆發(fā)會嚴重影響水稻的產(chǎn)量,甚至絕

4、收,挖掘褐飛虱抗性資源和培育抗性品種是減少褐飛虱危害最經(jīng)濟有效的辦法。
　　由藥用野生稻衍生來的水稻品系B5對褐飛虱生物型1和2具有很高的抗性,B5攜帶的抗性基因Bph14和Bph15分別被定位在第3和第4染色體上,我們以B5為抗褐飛虱供體親本,通過回交與分子標記輔助選擇育種技術將褐飛虱抗性基因導入到雜交組合的保持系“滬旱1B”和恢復系“秀水123”“湘晴”“旱恢3號”。為節(jié)水抗旱雜交稻的培育提供了褐飛虱抗性親本和培育適應長江下游

5、地區(qū)的常規(guī)粳稻品種。實驗中根據(jù)前人研究結果合成了6對用于MAS檢測的標記,通過對供體親本與受體親本多態(tài)性檢測分析,選定了分別與Bph14和Bph15緊密連鎖的標記Bph14-2和MS5在抗感親本及其雜交回交后代群體中進行跟蹤選擇,實驗中用Bph14和Bph15基因選擇標記Bph14-2和MS5檢測了1944份后代材料,通過分子檢測得到含有Bph14基因的材料有291份,其中帶型為3的雜合株系18份,帶型為2的純合株系273份。有Bph1