優(yōu)良綠僵菌菌株的篩選及應(yīng)用性研究.pdf

1、本研究對(duì)保定地區(qū)土壤中僵菌資源進(jìn)行了調(diào)查研究,利用黃粉蟲誘集法獲得白僵菌178株,綠僵菌279株僵菌,對(duì)分離獲得的菌株進(jìn)行了初步篩選。
　　 通過混合毒力測(cè)定方法,選出20株具有較高致病力的金龜子綠僵菌菌株。20株菌株死亡率在66.67％～100.00%之間,僵蟲率在42.22%～100.00%之間,致死中時(shí)在2.64d～5.72d之間。各菌株僵蟲率從大到小依次為:[M7-9,M7-(16.18)]＞M7-(64-65)＞M7-

2、(283—285)＞[M7-287,M7-1051＞M7-169＞[M7-19,M8-249]＞M7-119＞M7-130＞[M7-(58-59),M7-67,M7-77]＞[M7-184,M7-(83-84)]＞[M7-43,M7-194]＞M7-149＞M7-57;,致死中時(shí)從小到大依次為:M7-9＞M7-(16-18)＞M7-(283-285)＞M7-287＞M7-(64-65)＞M7-(58-59)＞M7-19＞M7-119＞M

3、7-67＞M7-43＞M7-184＞M7-130＞M7-105＞M8-249＞M7-77＞M7-169＞M7-149＞M7-57＞M7-(83-84)＞M7-194;在初篩獲得5株菌株的基礎(chǔ)上,以M7-9、M7-(16-18)、M7-(64-65)為研究對(duì)象,對(duì)美國白蛾、大豆卷葉螟、東亞飛蝗、榆藍(lán)葉甲、斜紋夜蛾、紅脊長(zhǎng)蝽、小菜蛾等不同齡期的幼蟲進(jìn)行殺蟲活性測(cè)定,最終確定3株毒力較好的菌株進(jìn)行抗紫外能力、抗高溫能力的測(cè)定,比較了它們?cè)诙喾N

4、條件下的性狀,并結(jié)合毒力測(cè)定的結(jié)果篩選出一株具有高毒力且性狀優(yōu)良的綠僵菌菌株M7-9。
　　 通過采用二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)方案,將篩選出的菌株:M7-9進(jìn)行液固雙向發(fā)酵研究,以產(chǎn)孢量為指標(biāo),選取較佳的發(fā)酵條件。在95%置信區(qū)間產(chǎn)孢量大于9.17×108孢子/g的優(yōu)化方案為液體培養(yǎng)基發(fā)酵時(shí)間72.24h～73.68h,固體培養(yǎng)基中水分比例88.24%～91.14%,麥殼占麥麩的比例16-34%～16.95%,液體種子液的接種量14

5、.85ml～15.24ml,固體培養(yǎng)基發(fā)酵天數(shù)7.94d～8.06d。為便于實(shí)際生產(chǎn),將優(yōu)化方案定為液體培養(yǎng)基發(fā)酵時(shí)間73h,固體培養(yǎng)基中水分比例90%,麥殼占麥麩的比例16.5%,液體種子液的接種量為15ml,固體培養(yǎng)基發(fā)酵天數(shù)8d。
　　 通過二次通用旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)方案得出的最佳培養(yǎng)條件,對(duì)綠僵菌菌株M7-9和M7-(16-18)進(jìn)行液固雙向發(fā)酵,后進(jìn)行田間試驗(yàn),施用劑量分別為1萬、5萬、10萬億孢子/畝(處理A,B,C),農(nóng)