甘蔗與斑茅割手密復(fù)合體雜交后代的遺傳分析.pdf

1、對斑茅與割手密雜交獲得的斑割復(fù)合體(GXAS07-6-1)分別與粵糖93-159和桂糖02-761雜交F1代進行染色體行為的初步分析;利用粵糖93-159與斑割復(fù)合體雜交F1代中的兩個材料(GXASF108-1-1、GXASF108-1-11)分別與Co649回交的后代(BC1)及桂糖02-761與斑割復(fù)合體雜交F1代中的兩個材料(GXASF108-3-2、GXASF108-3-11)分別與桂糖05-2743回交的后代(BC1)進行雜種

2、真實性鑒定，并對BC1代群體的主要性狀進行差異顯著分析和相關(guān)性分析，獲得6個綜合性狀較好的含斑茅和割手密血緣的材料;利用AFLP分子標(biāo)記對斑茅和割手密野生基因在后代的傳遞情況進行分析，主要結(jié)果如下:
　　 1、所試的兩個甘蔗品種分別與斑割復(fù)合體GXAS07-6-1雜交的染色體遺傳方式為“n+n”。其中，GXAS07-6-1的染色體數(shù)為2n=62，粵糖93-159的染色體數(shù)為2n=102，二者雜交F1代的染色體數(shù)為2n=82;桂糖

3、02-761的染色體2n=98，與GXAS07-6-1雜交后F1代的染色體2n=80。
　　 2、經(jīng)兩對SSR分子標(biāo)記引物鑒定，獲得了32個含斑割復(fù)合體和父本甘蔗血緣的真實雜種BC1代，即GXASF108-1-1與Co649回交后代GXASBC111-9組合材料;GXASF108-1-11與Co649回交后代GXASBC111-8組合材料;GXASF108-3-2與桂糖05-2743回交后代GXASBC111-2組合材料;GXA

4、SF108-3-11與桂糖05-2743回交后代GXASBC111-3組合材料。
　　 3、建立了穩(wěn)定高效的AFLP分子標(biāo)記體系。酶切至選擇性擴增的反應(yīng)體系為，25μL的樣品DNA經(jīng)3U EcoR I和Mse I14h可酶切完全，預(yù)擴增反應(yīng)體系是:0.4μLdNTPs(20mmol·mL-1),1.6μL Mg2+(25mmol·mL-1),2μL EcoR I-P(5pmol·mL-1),2μLMse I-P（5pmol·mL

5、-1），1UTaq酶(1U·μL-1)，5μL DNA液稀釋10倍，2μL10×PCRBuffer，8μL ddH2O;選擇性擴增反應(yīng)體系是:0.4μL dNTPs(20mmol·mL-1)，0.8μLMg2+(25mmol·mL-1),1μL EcoR I-a(6pmol·mL-1),1μL Mse I-b(6pmol·mL-1),3UTaq酶(1U·μL-1)，5μL DNA液稀釋20倍，2μL10×PCR Buffer，7.8μL

6、 ddH2O。
　　 4、利用AFLP分子標(biāo)記對斑茅或割手密特異基因在復(fù)合雜交利用過程中各世代間的傳遞進行分析，表明斑茅和割手密的擴增位點豐富，但是傳遞到后代的特異性位點數(shù)占擴增總位點數(shù)的比例低，分別是6.1％，4.6％，在F1代中選擇的親本會影響到BC1代基因的傳遞，總的傳遞趨勢是隨著世代的增加，基因會在后代中逐漸減少，其中割手密的基因在世代間減少的趨勢要比斑茅的慢。
　　 5、對BC1后代主要產(chǎn)量性狀和錘度的差異顯著