桃蛀果蛾Carposina sasakii復(fù)合體的AFLP分析.pdf

1、桃蛀果蛾復(fù)合體Carposina sasakii Matsumura complex危害多種果樹,是重要的果樹害蟲.因此深入研究其分化機(jī)制和狀態(tài),對于生物進(jìn)化理論的豐富和物種的正確劃分具有重要的理論意義,對于該害蟲的綜合防治措施的制定具有重要的現(xiàn)實(shí)意義.該研究利用AFLP技術(shù),對蘋果Maluspumila、海紅M.asiatica var.rinki、桃Prunus persica、杏 P.armeniaca、棗Zizyphus juj

2、uba、酸棗Z spinosus、山楂Crataegus pinnatifida、7個寄主上的桃蛀果蛾種群以及山茱萸蛀果蛾C. coreana Kim種群進(jìn)行了親緣關(guān)系分析,并建立了適合桃蛀果蛾AFLP分析的方法.從常用的5對內(nèi)切酶組合中選擇TaqI/PstI內(nèi)切酶組合,對桃蛀果蛾基因組DNA進(jìn)行酶切,結(jié)果表明,TaqI/PstI適用于作為桃蛀果蛾AFLP分析的內(nèi)切酶.從15對選擇性引物組合中篩選出10對具有良好多態(tài)性的引物進(jìn)行了AFL

3、P分析.用這10對選擇性引物組合,共擴(kuò)增出771條清晰的條帶,平均每對引物擴(kuò)增出77.1條帶.其中多態(tài)性條帶741條,平均每對引物擴(kuò)增出74.1條,多態(tài)性檢出率為96.1%.不同寄主上桃蛀果蛾種群的擴(kuò)增條帶數(shù)不同,擴(kuò)增條帶數(shù)以杏種群最多,為437條,擴(kuò)增條帶數(shù)最少的是海紅種群,為250條.其它依次為桃種群406條,棗種群402條,蘋果種群394條,酸棗種群284條,山楂種群338條,山茱萸蛀果蛾種群255條.利用NTSYS-pc2.1分

4、析軟件計算了10對引物組合各自在8個寄主桃蛀果蛾混合DNA池之間的遺傳距離,得到UPGMA和Ni法聚類圖.另外,對10對引物進(jìn)行了總體分析,得到其平均遺傳距離,利用UPGMA和Nj法構(gòu)建了桃蛀果蛾復(fù)合體的系統(tǒng)進(jìn)化樹.親緣關(guān)系分析表明:蘋果種群與桃種群親緣關(guān)系最近,與其它種群親緣關(guān)系依次為:棗種群、杏種群,山楂種群、酸棗種群、海紅種群、山茱萸蛀果蛾種群.蘋果種群、桃種群、棗種群和杏種群親緣關(guān)系較近,與其它4個種群的親緣關(guān)系較遠(yuǎn).使用SPS