肉桂醛對(duì)番茄采后灰霉病的抑制作用及其生理品質(zhì)的影響.pdf

1、以番茄灰霉病菌(Botrytiscinerea)為供試菌，用肉桂醛對(duì)灰葡萄孢菌進(jìn)行處理，在離體條件下觀察灰葡萄孢菌菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的情況，并通過(guò)對(duì)肉桂醛處理后灰葡萄孢菌的細(xì)胞膜滲透率和菌絲浸提液中可溶性糖、可溶性蛋白含量的測(cè)定，初步探究其抑菌機(jī)理;通過(guò)調(diào)查肉桂醛浸泡處理活體接種的番茄果實(shí)發(fā)病情況及番茄果實(shí)中抗病相關(guān)酶活性和相關(guān)物質(zhì)的含量測(cè)定，探究肉桂醛對(duì)番茄灰霉病的防治效果，及其誘導(dǎo)抗病性的機(jī)理;研究通過(guò)肉桂醛浸泡處理的番茄果實(shí)貯藏期

2、間發(fā)病情況及其生理營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的變化。研究結(jié)果如下:
　　1、以灰葡萄孢菌(Botrytiscinerea)的分生孢子和菌絲為研究對(duì)象，在離體條件下配制10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL和60μg/mL的肉桂醛帶毒PDA培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌孢子涂布試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)肉桂醛對(duì)灰葡萄孢菌的孢子萌發(fā)具有較好的抑制效果，肉桂醛濃度與孢子萌發(fā)率呈顯著負(fù)相關(guān)，其對(duì)孢子萌發(fā)的EC50值為31.956μg/mL，濃度越高對(duì)孢子萌發(fā)的抑制效果越好，在濃度

3、為60μg/mL時(shí)對(duì)孢子萌發(fā)抑制率達(dá)100％。顯微鏡下觀察孢子萌發(fā)形態(tài)發(fā)現(xiàn)處理組孢子芽管粗短或沒(méi)有，芽管壁粗糙，孢子萌發(fā)遲緩;而對(duì)照組孢子萌發(fā)迅速，芽管細(xì)長(zhǎng)，芽管壁光滑。用50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL和200μg/mL的帶毒PDA培養(yǎng)基對(duì)灰葡萄孢菌的菌絲進(jìn)行離體培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，肉桂醛對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制中濃度為95.596μg/mL，肉桂醛濃度越高，對(duì)菌落直徑擴(kuò)展的抑制效果越好，到200μg/mL時(shí)能夠完全抑制菌絲生長(zhǎng)。對(duì)灰

4、葡萄孢菌的菌落形態(tài)進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，高濃度肉桂醛處理的灰葡萄孢菌的菌絲較對(duì)照稀少，所產(chǎn)生色素積累較對(duì)照深，且菌絲生長(zhǎng)分布不均勻，向中間聚攏生長(zhǎng)。在顯微鏡下觀察，處理組菌絲表面較對(duì)照粗糙，產(chǎn)生內(nèi)容物凝集，原生質(zhì)體滲漏，菌絲空泡化，發(fā)黑萎縮的現(xiàn)象。在濃度分別為50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL和200μg/mL的肉桂醛藥液中對(duì)灰葡萄孢菌的菌絲進(jìn)行搖床培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，在培養(yǎng)160min后，200μg/mL肉桂醛處理細(xì)胞膜的滲透率最高，達(dá)

5、到61.2％，而對(duì)照組僅為14％;其菌絲浸提液中可溶性蛋白和可溶性糖的含量極顯著高于對(duì)照組(P＜0.01)，說(shuō)明肉桂醛處理能夠破壞灰葡萄孢菌菌絲細(xì)胞膜的選擇滲透性，從而致使細(xì)胞內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的滲漏，使得細(xì)胞內(nèi)外電解質(zhì)失衡，從而抑制菌絲的生長(zhǎng)。
　　2、肉桂醛能夠抑制人工接種灰葡萄孢菌的番茄果實(shí)的發(fā)病情況，抑制病斑直徑，降低發(fā)病率。在接種第5d對(duì)照組和1000μg/mL處理的番茄果實(shí)已全部發(fā)病，2000μg/mL發(fā)病率為32.1％，40

6、00μg/mL僅為11.3％。以4000μg/mL肉桂醛處理的番茄果實(shí)分別在24h、48h、72h、96h和120h進(jìn)行間隔損傷接種，發(fā)現(xiàn)在96h時(shí)番茄果實(shí)病斑直徑最小，說(shuō)明肉桂醛能夠誘導(dǎo)番茄果實(shí)的抗病性，且持續(xù)時(shí)間為96h。以?xún)H刺傷、刺傷+接種和刺傷+接種+肉桂醛為處理，不刺傷不接種為空白對(duì)照，測(cè)定果實(shí)中POD、PPO、PAL活性和總酚類(lèi)黃酮含量變化，發(fā)現(xiàn)刺傷+接種+肉桂醛處理組三種酶的活性最高，在達(dá)到高峰時(shí)其活性分別為2.40U/g

7、FW、2.69U/gFW和4.25U/gFW，而對(duì)照組分別為0.82U/gFW、1.76U/gFW和3.09U/gFW，說(shuō)明肉桂醛能夠通過(guò)提高番茄果實(shí)中抗病相關(guān)酶的活性和抗病物質(zhì)總酚和類(lèi)黃酮的含量來(lái)提高果實(shí)的抗病性。
　　3、探究了肉桂醛處理自然發(fā)病的番茄果實(shí)在貯藏期間發(fā)病情況和生理生化品質(zhì)的變化，發(fā)現(xiàn)肉桂醛能夠明顯抑制番茄果實(shí)貯藏期間的發(fā)病率，減少病情指數(shù)。4000μg/mL、2000μg/mL和1000μg/mL肉桂醛處理的番

8、茄果實(shí)貯藏第15d發(fā)病率分別為8.3％、30.7％和89.3％，此時(shí)對(duì)照組已100％發(fā)病;病情指數(shù)分別為14、26和33，對(duì)照組高達(dá)56。4000μg/mL肉桂醛處理能夠明顯抑制番茄果實(shí)的失重，到第15d失重率僅為0.5％，而對(duì)照組高達(dá)4％;其硬度是對(duì)照組的4.3倍;可溶性固形物、可滴定酸和維生素C含量分別是對(duì)照組的1.7倍、2.6倍和1.9倍，因此4000μg/mL是番茄果實(shí)采后貯藏保鮮的最佳處理濃度，在此濃度下其能夠維持番茄果實(shí)貯藏