成肌因子介導(dǎo)microRNA表達的力學信號調(diào)控.pdf

1、南方醫(yī)科大學2011級碩士學位論文成肌因子介導(dǎo)microRNA表達的力學信號調(diào)控一o11‘‘‘1111‘■’StudyonmechanicalsignalsregulationinmyogenlcfactormediatedmicroRNAexpression課題來源：國家自然科學基金(31100700)學位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院張馬輝邱小忠教授人體解剖與組織胚胎學學術(shù)型碩士基礎(chǔ)醫(yī)學院2014年3月20日廣州中文

2、摘要果蠅、Hela細胞等許多真核模式生物和細胞中找到了數(shù)百種相似的小分子RNA，并將其稱為miRNA(micmRNA)。MicroRNA是小分子的進化上高度保守的非編碼RNAs，其由RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄作為編碼一個或多個miRNAs的長前體miRNAs。大部分miRNA作為獨立的轉(zhuǎn)錄本被轉(zhuǎn)錄，但大約有1／3嵌在蛋白編碼基因的內(nèi)含子中，被前信使RNAs剪接。PrimiRNAs在胞核中經(jīng)蛋白質(zhì)Drosha和DGCR8剪切，產(chǎn)生一個60～70

3、bp的具有發(fā)夾樣結(jié)構(gòu)的RNA，稱為前體miRNA(precursormiRNA，premiRNA)，Exprotin5將其由胞核運至胞質(zhì)，在胞質(zhì)中Dicer酶將其剪切成為2125bp的雙鏈RNA。這個雙鏈RNA由Dicer酶上釋放，在解螺旋酶作用下分離，其中一條單鏈與RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RNAinducedsilencingcomplex，msc)結(jié)合，與目標mRNAs互補，發(fā)揮miRNA功能，另一條立即被降解。miRNAs通過與靶m

4、RNA3qJTRs序列特異性互補，調(diào)節(jié)基因表達，導(dǎo)致翻譯抑制或使mRNA失去穩(wěn)定性。對靶mRNA結(jié)合特異性互補的主要決定因素是由miRNA5’末端WatsonCrick28個堿基配對核苷酸決定，稱為“種子序列”。然而，這個區(qū)域外的核苷酸作為mRNA3UTR序列環(huán)繞區(qū)域的二級結(jié)構(gòu)，同樣影響mRNA抑制，且其miRNA的靶向定位與開放讀框有關(guān)。microRNA與其靶基因的互補程度決定其作用模式：l、microRNA與靶mRNA完全互補結(jié)合，

5、切割靶mRNA。2、microRNA與靶mRNA不完全互補結(jié)合，抑制靶蛋白翻譯而不影響mRNA穩(wěn)定性。3、同時具有以上兩種作用模式。肌組織特異表達的三種miRs：即miR1，miR133和miR206，它們被證實主要作用在肌原細胞或成肌細胞增殖、分化為成熟肌管的過程中。體外組織培養(yǎng)細胞可模擬體內(nèi)肌肉增殖分化過程。使用C2C12細胞模型系統(tǒng)，過表達和敲除實驗已應(yīng)用于研究肌肉miRNA的功能。在C2C12成肌細胞中過表達的miR1和miR2