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1、鐵皮石斛是傳統(tǒng)珍貴中藥材,多糖是其主要功效性成分,是目前判斷鐵皮石斛品質(zhì)的主要依據(jù)。多糖的合成是以蔗糖為前體物質(zhì)的,因此研究鐵皮石斛多糖積累與蔗糖代謝的相關(guān)性,對(duì)于提高鐵皮石斛多糖含量及品質(zhì)育種有重要意義。本文通過生理生化及分子生物學(xué)手段,對(duì)鐵皮石斛組培苗及鐵皮石斛藥材中糖含量、蔗糖代謝相關(guān)酶活性及表達(dá)量進(jìn)行測(cè)定,初步揭示了鐵皮石斛多糖積累與蔗糖代謝的關(guān)系;通過調(diào)控培養(yǎng)基中蔗糖濃度,探索了提高鐵皮石斛植株中多糖含量的方法。本文取得如下結(jié)
2、果:
對(duì)不同培養(yǎng)時(shí)間(3個(gè)月、5個(gè)月、7個(gè)月)鐵皮石斛組培苗的研究結(jié)果表明:鐵皮石斛組培苗莖及葉中多糖、葡萄糖、蔗糖和還原糖的含量均隨植株培養(yǎng)時(shí)間的增加呈逐步升高的趨勢(shì),而果糖含量則隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì);還原糖與蔗糖的比值隨著生長(zhǎng)進(jìn)程的推進(jìn)不斷降低,即前期主要積累還原糖,后期逐漸積累蔗糖;多糖、葡萄糖、蔗糖之間均呈顯著正相關(guān);葉片中 SPS、SS的活性均高于同時(shí)期莖中SPS及SS的活性,說明蔗糖合成的主要部位是葉片;蔗
3、糖合成酶SPS、SS共同作用于蔗糖的合成,但SPS的作用相比SS更顯著;酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)是鐵皮石斛蔗糖分解的主要酶;堿性轉(zhuǎn)化酶(NI)在鐵皮石斛的生長(zhǎng)階段變化不顯著且活性較??;組培苗中多糖含量與AI活性呈顯著正相關(guān)(R=0.830,P<0.05)。
對(duì)2個(gè)鐵皮石斛品系(78×69、6A×2B)不同時(shí)期(7月、12月、次年4月)藥材的研究結(jié)果表明:2個(gè)鐵皮石斛品系在不同采收期其糖分及蔗糖代謝酶的變化趨勢(shì)一致;莖中多糖含量逐漸升
4、高,葉中多糖含量在12月時(shí)降低,次年4月又出現(xiàn)回升;SPS、SS及AI酶活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。這是由于在12月低溫環(huán)境下,鐵皮石斛通過提高AI及SS、SPS活性從而提高可溶性糖含量,緩解低溫對(duì)植株的傷害。
研究蔗糖濃度(20 g/L、35 g/L、50 g/L)及培養(yǎng)時(shí)間(2個(gè)月、4個(gè)月、6個(gè)月)對(duì)鐵皮石斛組培苗多糖積累及蔗糖代謝的影響。結(jié)果表明:在培養(yǎng)4個(gè)月后,三個(gè)蔗糖濃度組培苗中莖多糖含量存在顯著差異;隨著培養(yǎng)基中蔗
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