魚類組織細(xì)胞培養(yǎng)及魚類胚胎細(xì)胞的冷凍保存與培養(yǎng)技術(shù)的初步研究.pdf

1、湖南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文魚類組織細(xì)胞培養(yǎng)及魚類胚胎細(xì)胞的冷凍保存與培養(yǎng)技術(shù)的初步研究姓名：鄧云申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師：張軒杰20020301正常，4n為187—200之間，末發(fā)現(xiàn)明顯的異倍化現(xiàn)象。另一個(gè)方面，本文主要以泥鰍胚胎細(xì)胞為材料，根據(jù)細(xì)胞凍存的有關(guān)原理技術(shù)，進(jìn)行泥鰍胚胎細(xì)胞制備、冷凍保存、解凍、原代培養(yǎng)研究。研究初步表明：以細(xì)胞培養(yǎng)液M199(含20％的小牛血清，常規(guī)量雙抗)為凍存稀釋液，對(duì)泥鰍胚胎細(xì)胞冷凍保存宜

2、采取先慢后快的方式(例如，從OC6℃，凍存速度為一005℃／min，再以一05℃／min的速度從一6℃一一40℃)；DMSO的保護(hù)效應(yīng)濃度為125％左右；小牛血清的濃度對(duì)泥鰍胚胎細(xì)胞的成活率影響不明顯；囊胚晚期細(xì)胞抗凍性比中早期強(qiáng)；通過(guò)對(duì)不同批次的凍存細(xì)胞解凍培養(yǎng)，解凍后成活率為30％pA上細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)天后，均有少數(shù)細(xì)胞貼壁，但只發(fā)現(xiàn)兩瓶培養(yǎng)細(xì)胞有明顯增殖現(xiàn)象，產(chǎn)生許多未分化的小細(xì)胞。以細(xì)胞培養(yǎng)液M199(含20％的小牛血清)為稀釋液，D