月季愈傷組織培養(yǎng)及其ETR1 cDNA轉(zhuǎn)化矮牽牛的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、為了提供月季無菌苗種質(zhì)保存的適宜培養(yǎng)基,分析了不同激素組合對(duì)月季不定芽增殖的影響;研究了不同因素對(duì)不同月季切花品種愈傷組織發(fā)生的作用,并且對(duì)不同培養(yǎng)時(shí)間的愈傷組織進(jìn)行了顯微觀測(cè);為了研究月季切花ETR1 cDNA的功能,構(gòu)建了ETR1 cDNA的反義植物表達(dá)載體,并用根癌農(nóng)桿菌LBA4404轉(zhuǎn)化了矮牽牛.主要研究結(jié)果如下:(1)顯微觀測(cè)的結(jié)果表明,培養(yǎng)1代的月季愈傷組織細(xì)胞體積小,細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)致密,具有成胚潛力;而培養(yǎng)18代的愈傷組織細(xì)胞

2、膨大松散,不具備繼續(xù)分化的潛力.(2)構(gòu)建了切花月季ETR1 cDNA的兩個(gè)克隆ETR1D3、ETR1V4的反義植物表達(dá)載體pBinETR1D3和pBinETR1V4;并轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌LBA4404,構(gòu)建Ti質(zhì)粒.(3)根癌農(nóng)桿菌LBA4404轉(zhuǎn)化矮牽牛葉片,pBinETR1D3的轉(zhuǎn)化率為0.53﹪,PCR檢測(cè)的陽性率為91﹪,初步證明ETR1 cDNA已經(jīng)整合到矮牽牛的基因組中;RT-PCR檢測(cè)結(jié)果證明,轉(zhuǎn)入的ETR1 cDNA已經(jīng)在

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