紅麻的器官培養(yǎng)及原生質(zhì)體培養(yǎng).pdf

1、紅麻(Hibiscus cannabinus L.)是一種古老而具有新概念的作物,進(jìn)入21世紀(jì)后,其綜合開發(fā)利用受到世界各國的重視,尤其是在美國、日本、法國等經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)的國家,因此對紅麻進(jìn)行種質(zhì)創(chuàng)新顯得至關(guān)重要.紅麻的器官培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng)是品種快繁、變異體篩選以及體細(xì)胞雜交和遺傳轉(zhuǎn)化等生物技術(shù)育種的基礎(chǔ).本文對紅麻下胚軸、試管苗莖段、子葉、真葉、腋芽及原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行了研究.研究結(jié)果如下:1.以紅麻無菌苗的下胚軸、莖段、子葉和真葉為外植

2、體,研究MS附加不同的激素組合對愈傷組織誘導(dǎo)的影響,發(fā)現(xiàn)低濃度2,4-D(0.05 mg/L、0.1 mg/L)附加不同濃度6-BA誘導(dǎo)下胚軸皮層細(xì)胞分裂產(chǎn)生白色堅(jiān)硬愈傷組織;高濃度2,4-D(1.0 mg/L、2.0 mg/L)附加不同濃度6-BA誘導(dǎo)下胚軸維管形成層細(xì)胞發(fā)生分裂形成黃色疏松愈傷組織.從下胚軸和莖段誘導(dǎo)出的兩類愈傷組織有較高的出愈率和較強(qiáng)的生長勢.1.0-2.0 mg/L的2,4-D、0.1-1.0 mg/L的6-BA

3、組合是子葉、真葉誘導(dǎo)愈傷的較佳激素組合.2.紅麻的7天齡無菌苗子葉、25天齡無菌苗真葉在附加3.5 mg/L TDZ和0.1 mg/L NAA的MS培養(yǎng)基上可直接誘導(dǎo)出不定芽.品種722的7天齡無菌苗子葉的不定芽誘導(dǎo)率達(dá)到13個芽/外植體.但品種917子葉卻未能誘導(dǎo)出不定芽.3.無菌苗節(jié)間莖段在附加0.1 mg/L 6-BA的MS培養(yǎng)基上能長出正常、健壯的苗.在附加0.2 mg/L TDZ的MS培養(yǎng)基上能誘導(dǎo)出叢生芽,但叢生芽只有轉(zhuǎn)入0

4、.1 mg/L NAA的培養(yǎng)基中后,莖才能伸長生長.4.研究了IAA、NAA、6-BA對下胚軸生根的影響,石蠟切片顯示,不定根發(fā)生在維管形成層及其附近的薄壁細(xì)胞.5.采用暗培養(yǎng)3天齡的無菌苗下胚軸,在含0.5﹪?yán)w維素酶(Cellulose R-10)、0.5﹪果膠酶(Pectinase)的酶解液中,甘露醇為0.45M的滲透壓條件下,酶解12h的原生質(zhì)體的產(chǎn)量最高,活力強(qiáng).6.研究了不同滲透壓濃度、不同類型的培養(yǎng)基和不同培養(yǎng)方法對原生質(zhì)體