生產(chǎn)生物農(nóng)藥的海洋微生物的篩選.pdf

1、采用化學(xué)藥物防治水產(chǎn)動物病害誘導(dǎo)病原菌株產(chǎn)生的耐藥性，以及藥物的殘留問題，已經(jīng)逐漸引起人們的關(guān)注。用生物農(nóng)藥替代化學(xué)藥物是解決該問題的有效措施之一。本文以浙江沿海的微生物為研究對象，對其胞外酶活性、抑菌以及殺蟲活性進行研究，并以這三種活性為指標(biāo)建立篩選具生物農(nóng)藥活性的菌株的模型，以期為生物農(nóng)藥的研法提供科學(xué)依據(jù)。 在2002年8月-12月間共采集細菌2314株，放線菌和霉菌50株。對采集的細菌進行自然、高溫（50℃）、酸性（pH

2、4.5）、高鹽（55‰）四種條件下的處理，對淀粉酶等四種胞外酶活性進行分析，觀察采樣時間和培養(yǎng)條件對它的影響并從中篩選出具有強酶活的細菌。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在自然條件下，采樣時間對細菌的胞外酶活力有很大影響；在高溫條件下四種酶的活性弱于自然條件，只有極少數(shù)幾個月強于自然條件；高鹽條件下，酪蛋白酶受其影響較小，其他酶受其影響很大；酸性條件下，膠原蛋白酶受其影響相對較小，其他酶受其影響很大。此外，通過對四種酶比較發(fā)現(xiàn)，具有強酪蛋白酶和膠原蛋白酶活力

3、的細菌比例明顯高于具淀粉酶的，而淀粉酶的略強于酯酶。故具有強酶活的細菌多在自然條件下篩選。 對采自不同時間的細菌的苯丙氨酸脫氨酶活性研究發(fā)現(xiàn)，隨著時間的推移酶活性呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢，即夏季高、秋冬季低；此外它的變化趨勢與環(huán)境中的分子氨的含量呈一定的正相關(guān)關(guān)系，此酶活性過高會造成環(huán)境中氨量增加而破壞環(huán)境，因此可以將苯丙氨酸脫氨酶作為一個篩選指標(biāo)。 運用SPSS軟件對四種酶進行聚類分析，發(fā)現(xiàn)不論外界條件如何變化膠原蛋白酶和

4、酪蛋白酶距離都較接近，而淀粉酶和酯酶一般位于聚類的外群。所以兩種蛋白酶可以任選一種，與淀粉酶和酯酶共同作為篩選酶的模型。但是由于以四種酶為依據(jù)對細菌聚類分析時并不依據(jù)酶活性大小分類，所以不能作為篩選細菌的模型。而在對溶血活性的研究中發(fā)現(xiàn)有59株細菌具有較強活性，所以將這59株菌作為進行生物篩選的目的菌。 對海洋微生物的抑菌和殺蟲活性研究發(fā)現(xiàn)，利用溶血活性篩選出的59株細菌中有48株能抑制革蘭氏陰性菌，其中有19株具有強活性；抑制