一種新穎β-,2--激動(dòng)劑檢測系統(tǒng)的研究.pdf

1、β<,2->腎上腺素能激動(dòng)劑(簡稱β<,2->激動(dòng)劑)中有一類人工合成激素類藥物,如Clenbuterol(克倫特羅)、Salbutamol(沙丁胺醇)等,臨床上用于治療哮喘和支氣管痙攣等相關(guān)疾病.β<,2->激動(dòng)劑能與細(xì)胞膜上的β<,2->腎上腺素能受體(β<,2->adrenergic receptor,β<,2->AR,簡稱β<,2->受體)結(jié)合,激活與受體偶聯(lián)的腺苷酸環(huán)化酶,改變細(xì)胞代謝過程,刺激脂肪組織釋放脂肪酸,增加蛋白質(zhì)合

2、成,從而有增強(qiáng)肌肉,減少脂肪的生理效應(yīng).這一特點(diǎn)使它們常被用作生長促進(jìn)劑而添加于飼料中,以提高家畜的瘦肉率(俗稱瘦肉精).中國農(nóng)業(yè)部在1997年3月嚴(yán)令禁止β<,2->激動(dòng)劑在動(dòng)物飼養(yǎng)中的應(yīng)用.但目前國內(nèi)非法使用情況仍非常嚴(yán)重,因此迫切需要建立快速、靈敏、特異的β<,2->激動(dòng)劑的檢測方法,防止β<,2->激動(dòng)劑濫用.根據(jù)β<,2->激動(dòng)劑與β<,2->受體相結(jié)合產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)的原理,我們試圖建立一種新的檢測系統(tǒng)—受體-配體檢測系統(tǒng),即

3、利用酶標(biāo)記β<,2->激動(dòng)劑與β<,2->受體競爭性結(jié)合反應(yīng)來檢測樣品中的β<,2->激動(dòng)劑.由于在體內(nèi)β<,2->激動(dòng)劑行使功能是通過β<,2->受體介導(dǎo),所以理論上此檢測系統(tǒng)可能檢測所有的β<,2->激動(dòng)劑.在建立受體-配體檢測系統(tǒng)中,本項(xiàng)課題試圖解決兩個(gè)主要技術(shù)難點(diǎn):1、合成酶標(biāo)記β<,2->激動(dòng)劑(克倫特羅).我們在克倫特羅交聯(lián)辣根過氧化物酶時(shí)引入一13個(gè)原子長度的連接臂(space arm),克服了酶標(biāo)記克倫特羅與β<,2->