24384.環(huán)化蛋白的熱穩(wěn)定性研究

1、上海交通大學(xué)學(xué)位論文上海交通大學(xué)學(xué)位論文環(huán)化蛋白的熱穩(wěn)定性研究環(huán)化蛋白的熱穩(wěn)定性研究姓名：張琳學(xué)號(hào):1080809044系所：生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院研究方向：生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)校：上海交通大學(xué)指導(dǎo)老師：劉建華(教授)2011年2月姓名：張琳學(xué)號(hào):1080809044系所：生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院研究方向：生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)校：上海交通大學(xué)指導(dǎo)老師：劉建華(教授)2011年2月上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文環(huán)化蛋白的熱穩(wěn)定性研究環(huán)化蛋白的熱穩(wěn)定性研究

2、摘要摘要生物體絕大部分蛋白質(zhì)在體內(nèi)表達(dá)后往往以線性的形式折疊為功能性的蛋白質(zhì)。在體內(nèi)溫和的環(huán)境下，由線性鏈結(jié)構(gòu)折疊來(lái)的蛋白質(zhì)可以有效地行使其相應(yīng)的生物學(xué)功能。隨著蛋白質(zhì)工程的發(fā)展，越來(lái)越多的酶類應(yīng)用到工業(yè)生產(chǎn)中。為了追求更佳的反應(yīng)速度或經(jīng)濟(jì)效益，工業(yè)應(yīng)用的酶促反應(yīng)與活體內(nèi)的酶促反應(yīng)環(huán)境是有差異的，不能及時(shí)更新?lián)p耗失活的酶，為了克服這些障礙，科學(xué)家們嘗試了各種辦法增加酶的穩(wěn)定性，包括篩選耐熱突變體、化學(xué)修飾、添加穩(wěn)定劑、改變離子濃度以及包

3、被技術(shù)等等。這些方法雖然能夠提高蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性，但是盲目性大，需要從一系列條件中篩得合適的方案才能實(shí)現(xiàn)其目標(biāo)。M.Trabi和D.J.Craik等的研究指出，環(huán)化蛋白與線性蛋白相比，熱穩(wěn)定性高，蛋白質(zhì)生物活性不受影響。因此，蛋白質(zhì)的環(huán)化可能是增加蛋白質(zhì)熱穩(wěn)定性的有效途徑?；谶@種思路，我們利用革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的轉(zhuǎn)肽酶StaseA環(huán)化基因工程生產(chǎn)的GFP（綠色熒光蛋白）和ApeRNHaseHII（Ape核糖核酸酶HII）?；蚬こ躺a(chǎn)的G