16070.氧化葡萄糖酸桿菌的固定化及其活性評(píng)價(jià)的研究

1、分類號(hào)：Q8142密級(jí)：UDC：華東理工大學(xué)學(xué)位論文氧化葡萄糖酸桿菌的固定化及其活性評(píng)價(jià)的研究王存勛指導(dǎo)教師姓名：任宇紅教授華東理工大學(xué)生物工程學(xué)院申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士論文定稿日期：20130109學(xué)位授予單位：專業(yè)名稱：藥學(xué)論文答辯日期：20130222華東理工大學(xué)學(xué)位授予日期：2Q13霉11曼1毫囂答辯委員會(huì)主席：葉邦策評(píng)閱人：沈亞領(lǐng)蘇二正華東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文第1頁(yè)氧化葡萄糖酸桿菌的固定化及活性評(píng)價(jià)的研究摘要氧化葡萄糖酸桿菌(a材

2、cD玎D6口c冊(cè)D砂婦瑚)由于其細(xì)胞內(nèi)與膜上含有豐富的氧化還原酶并且結(jié)合自身不完全氧化的特征成為生物工業(yè)中廣泛使用的微生物。本文利用大孔樹(shù)脂、硅藻土、殼聚糖及其衍生物Catech01殼聚糖作為固定化載體材料進(jìn)行G似脅的固定化并對(duì)其活性評(píng)價(jià)，通過(guò)對(duì)固定化材料的選擇和固定化方法的優(yōu)化來(lái)達(dá)到最佳的固定化效果。第1部分：利用大孔樹(shù)脂和硅藻土，并對(duì)大孔樹(shù)脂與硅藻土進(jìn)行多巴胺修飾，殼聚糖及Catcch01殼聚糖作為載體進(jìn)行氧化葡萄糖酸桿菌的固定化。

3、固定化后，大孔樹(shù)脂與多巴胺修飾的大孔樹(shù)脂固定化率分別為62％和83％；活力回收率為66％，68％，硅藻土與多巴胺修飾的硅藻土固定化率為8l％和84％，活力回收率65％和61％，殼聚糖與戊二醛交聯(lián)及Catech01殼聚糖的固定化率為100％和64％，活力回收率52％和76％。大孔樹(shù)脂，硅藻土固定化G嬲咖后，菌體與材料的結(jié)合力比較弱，菌體容易脫落，在200印m的搖床上振搖35小時(shí)后菌體殘留量為50％左右。在固定化細(xì)胞的重復(fù)利用上重點(diǎn)研究了C

4、atech01殼聚糖與利用戊二醛和殼聚糖進(jìn)行交聯(lián)這兩種方法，經(jīng)過(guò)6批次反應(yīng)后相對(duì)細(xì)胞活性分別為58％和49％。第2部分：利用殼聚糖作為載體材料，戊二醛為交聯(lián)劑，碳酸氫鈉作為致孔劑進(jìn)行G甜塒a，zs的固定化并研究其活性優(yōu)化固定化條件：殼聚糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％，戊二醛的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為O5％，碳酸氫鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％，產(chǎn)物利用HPLC進(jìn)行測(cè)定。通過(guò)對(duì)條件的優(yōu)化，固定化率達(dá)到100％，活力回收率達(dá)到92％。最優(yōu)的溫度和pH分別為30℃和60。在重