犬乳腺腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)聯(lián)因子及細胞系性狀解析.pdf

1、犬乳腺腫瘤是獸醫(yī)臨床常見的一種腫瘤性疾病。犬乳腺腫瘤病因、腫瘤組織學(xué)特性、藥物和手術(shù)治療方法以及預(yù)后等都與人類乳腺腫瘤較為相似。因此，自然發(fā)生乳腺腫瘤的犬已成為人類研究乳腺腫瘤疾病最好的動物模型。本實驗采用病理組織學(xué)和免疫組織化學(xué)、細胞生物學(xué)技術(shù)等方法針對收集到的犬乳腺腫瘤自然發(fā)生病例和犬乳腺腫瘤細胞系進行研究，以期為犬乳腺腫瘤疾病的診斷和治療提供理論依據(jù)。 實驗選用從自然發(fā)生乳腺腫瘤病例的原發(fā)病灶和轉(zhuǎn)移病灶分離培養(yǎng)的四種細胞(

2、CHMp、CHMm、CIPp、CIPm)，經(jīng)傳代120代以上、生長性狀穩(wěn)定的細胞系作為研究對象，對不同細胞系的性狀進行解析。通過消化法培養(yǎng)細胞生長，其生長曲線符合“S”形生長曲線，倍增時間分別為21.3h，35.3h，42.3h，49.1h。細胞經(jīng)多次傳代之后形態(tài)無顯著差異。采用MTT檢測和軟瓊脂培養(yǎng)比較分析：CHMp、CHMm不論是在細胞活力方面還是增值能力方面都要強于CIPp、CIPm。實驗結(jié)果證明，不同來源的細胞系生物學(xué)特性差異很

3、大。同時，本研究對外科手術(shù)摘除疑似乳腺腫瘤樣本10例，采用病理組織學(xué)觀察進行分類，采用免疫組織化學(xué)方法，使用抗p53和CD44抗體檢測病料組織，并對抗體表達和病理類型進行比較。結(jié)果證明，惡性乳腺腫瘤占50％，其中乳腺浸潤性導(dǎo)管癌占30％；良性腫瘤30％，其中乳腺非腫瘤性疾病20％。p53多克隆抗體在乳腺癌組織中的表達明顯高于良性乳腺腫瘤組織，差異極顯著。CD44在乳腺癌、良性腫瘤組織和非腫瘤組織中均有表達，無明顯差異。p53可作為動物預(yù)

4、后指征之一。通過對細胞系的免疫組織化學(xué)分析，結(jié)果顯示：不同細胞系中p53、CD44、VEGF三種抗體均為陽性反應(yīng)，但有不同的臨床意義：VEGF在4種細胞系中表達無差異，表明在轉(zhuǎn)移組和原發(fā)組乳腺腫瘤細胞中功能和作用機理類似；CD44在4種細胞系中的表達均有差異，表明其不能作為獨立的預(yù)后指標，需要其他因素共同參與調(diào)節(jié)乳腺腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移：p53在活性和增殖能力最弱的CIPm細胞中表達強度最弱，與組織中的表達結(jié)果相符合，證明1953作為動物預(yù)