花楸不同外植體的莖叢增生和愈傷組織誘導(dǎo)及植株再生.pdf

1、花楸(Sorbus pohuashanesis Hedl)是北方未被充分開(kāi)發(fā)利用的優(yōu)良的綠化樹(shù)種.我們以幼胚、成熟胚、無(wú)菌莖叢的莖段、成年樹(shù)的嫩葉和莖段等為外植體,首次通過(guò)不定芽和腋芽增殖途徑建立了兩套高效、可靠的組培再生系統(tǒng).1、以花楸幼胚為外植體的研究表明:(1)取材時(shí)期和激素濃度配比是影響花楸幼胚叢生芽誘導(dǎo)效果的主要因素.(2)叢生芽最佳的增殖培養(yǎng)基為WPM+BA0.3~0.5mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂7g/L,經(jīng)繼代培養(yǎng)一個(gè)

2、幼胚可誘導(dǎo)出7~20個(gè)小莖叢;帶有矮小不定芽的組織塊可繼代培養(yǎng)多次;(3)實(shí)驗(yàn)從改變培養(yǎng)基種類(lèi)、降低激素濃度、增加瓊脂濃度等方面采取有效的措施消除了莖叢增殖過(guò)程中的玻璃化現(xiàn)象;(4)當(dāng)莖叢高達(dá)2~3cm時(shí),轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根,篩選出最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.3mg/L或IBA0.2mg/L;(5)移栽前將根系發(fā)達(dá)的生根苗打開(kāi)瓶蓋馴化3-5天,移入裝有珍珠巖的塑料缽中煉苗一周,然后移栽到泥炭土和河沙以2:1混合的基質(zhì)中,

3、保持25±1℃,濕度>80﹪,成活率可達(dá)80﹪以上.2、以無(wú)菌莖叢的莖段為外植體,篩選出最佳的腋芽增殖培養(yǎng)基為:WPM+IBA(或NAA)0.05mg/L+BA1.0mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂7g/L,腋芽最大增殖倍數(shù)可達(dá)6.3、以花楸成熟胚為外植體,在添加BA、TDZ、IBA、2,4-D、NAA組成的不同激素組合的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng).4、以成年樹(shù)嫩葉和莖段為外植體,在添加BA、TDZ、IBA、NAA、2,4-D組成的不同激素組合的M

4、S培養(yǎng)基上培養(yǎng),以誘導(dǎo)愈傷組織的結(jié)果表明:(1)以幼嫩的莖段為外植體時(shí),從愈傷組織的誘導(dǎo)率、體積和生長(zhǎng)狀態(tài)綜合考慮,得出生長(zhǎng)素的效應(yīng)大小為NAA>2,4-D>IBA,最佳激素種類(lèi)組合為NAA1.0mg/L+BA0.5~3.0mg/L、2,4-D1.0mg/L+BA0.5~3.0mg/L或TDZ0.01~0.5mg/L;(2)以幼嫩的葉片為外植體時(shí),雖然誘導(dǎo)率可達(dá)100﹪,但只是在切口處長(zhǎng)小米粒大小的愈傷組織,生長(zhǎng)素的誘導(dǎo)效應(yīng)大小為2,4