禾谷縊管蚜翅型分化相關(guān)基因的cDNA克隆及分析.pdf

1、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文禾谷縊管蚜翅型分化相關(guān)基因的cDNA克隆及分析姓名：曹敏申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：農(nóng)業(yè)昆蟲與害蟲防治指導(dǎo)教師：高希武;程登發(fā)20040601A b s t r a c tR e s e a r c h e so nw i n gp o l y m o p h i s mo fa p h i d s h a v eb e e nw i d e l y c o n d u c t e ds i n c e 1 9 6

2、0 ’s ．T h e s er e s e a r c h e sh a v e c o n c e n t r a t e do nt h ei n d u c t i o no f e n v i r o n m e n t a lf a c t o r sa n dt h er e g u l a t i o no f h o r m o n eo n a p h i d s ’w i n gd e v e l o p m e

3、n t ．M a n yr e s e Ⅱc h i n d i c a t e d t h a t t h e r e a r e m a n yd i f f e r e n c e o ng e n ee x p r e s s i o ni nd i f f e r e n te n v i r o n m e n t ．S oi t i s v e r yi m p o r t a n tt h a t i n v e s t

4、 i g a t i n gt h ed i f f e r e n c eo ng e n ee x p r e s s i o nb e t w e e n a l a t ea n d a p t e r o u su s i n g m o l e c u l a r b i o l o g y t e c h n i q u e ，T h ed i f f e r e n c e o ng e n e e x p r e s

5、s i o n b e t w e e na l a t e a n da p t e r o u s a p h i d s i n 3 “l(fā) a r v a l s t a g e s o fR h o p a l o s i p h w n p a d i w a s i n v e s t i g a t e d ，u s i n g s u p p r e s s i o n s u b t r a c th y b r i

6、d i z a t i o n ( S S H ) t e c h n i q u e ．2 0 0 o fd i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e de D N Af r a g m e n bw e r ec l o n e d ．1 1 E x p r e s e dS e q u e n c eT a g s ( E S T s ) e x p r e s s e de x c l u

7、 s i v e l yi n a l a t el a r v a lw e r es c r e e n e db yt h em e t h o do f R e v e r s eN o = t h e m ．T h er e s u l to f11 E S T sD N A s e q u e n c ea n a l y s i ss h o w e dt h a t , o n eE S T n a m e dG I M

8、 f r a g m e n ts h a r e d8 3 ％h o m o l o g y w i t ht h eg e n e o f R h o —f a m i l y , G J l 8f r a g m e n tw a s w i t h9 8 ％h o m o l o g y t ot h eg e n e o f c o m m e n s a lb a c t e r i u mo fa p h i d ，B u

9、 c h n e r a a p h i d i c o l a , a n dt h eo t h e r9E S T s w e r eu n k n o w n g e n e s f r a g m e n t s ．G D 4w i t hp o l yA( n a m e l yw i t ha c o m p l e t e3 ’- e n ds e q u e n c e ) w a sc l o n e db y5 ’

10、一R A C E t e c h n i q u e ，a n dt h e n j o i n t e dt oo b t a i nt h ef u l l l e n g t he D N A ．R e s u l t so fs e q u e n c i n ga n dc h a r a c t e r i s t i ca n a l y s i ss h o w e dt h a tt h ef u l ll e n g

11、 t he D N A o f D 4w a s 9 8 6 b p , t h eo p e nr e a d i n gf r a m e o f 1 3 4w a s5 7 6 b p ，e n c o d i n g1 9 1a m i n o a c i d s ．T h e r e s u l t so f a l i g n m e n t w i t hd a t a b a s e i nG e n B a n k a

12、 n d T I G & s h o w e d t h a tG D 4 h a d 7 6 ．7 4 ％h o m o l o g yt o e D N Ao f c e l l d i v i s i o n c y c l e 4 2 ( e d c A 2 ) i nX e n o p u s l a e v i s ．7 0 ，0 5 ％t o e d e 4 2 i n D r o s o p h i l am e

13、 l a n o g a s t e r ．c d c , 4 2i sag c n co f R h o - f a m i l yb e l o n g e dt ol i t t l eG p r o t e i ns u p e r f a m i l i e s ．w i t hG T P a s ea c t i v i t y , w h i c hp l a y si m p o r t a n tr o l e si

14、nc e l ls i g n a lt r a n s d u c t i o n ，i n c l u d i n gc y t o s k e l e t a lr e o r g a n i z a t i o n ，p h e r o m o n er e s p o n s e , c e l lp r o l i f e r a t i o n ，c y t o k i n e s i s ．I na d d i t i

15、o n ，m a n yr e s e a r c h i n ga b o u tc o m m e n s a lb a c t e r i u mo fa p h i di n d i c a t e dt h a tc o m m e n s a lb a c t e r i u mm a y b ep l a y si m p o r t a n tr o l e si nd e v e l o po fa p h i d s

16、 ．I ts u g g e s t t h a tG D 4 a n d G J l 8m a y b es o m e k e y r e l a t e dg e n e sm e d i a t i n g t h ew i n g d i f f e r e n t i a t i o no fl a r v a la p h i di nP , h o p a t o s i p h u mp a a i ．F u r t

17、h e r m o r e ，o t h e r9u n k n o w ng e n e sw e r es u p p o s e dw h i c hm a y b e p l a ys o m ei m p o r t a n tr o l e si nw i n g d i f f e r e n t i a t i o no f l a r v a la p h i di nR h o p a l o s i p h u m

18、 p a a i ．W e ’I Id o m o r e e x p e r i m e n t f o r t h e m ．K e y w o r d s ：P d m p a l o s i p h w nt o n i ，g e n e sr e l a t e dt ow i n gd i f f e r e n t i a t i o ng e n e ，s u p p r e s s i o ns u b t r a c