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1、本文對(duì)鵝梨S基因型的鑒定及S基因的cDNA克隆進(jìn)行了研究。主要結(jié)果如下: 1、采用根據(jù)已報(bào)道梨S1~S9基因一級(jí)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的引物“PF”和“PR”對(duì)鵝梨基因組DNA進(jìn)行S基因特異擴(kuò)增,利用PCR-RFLP檢測(cè)系統(tǒng)和TA克隆技術(shù),分離鑒定了鵝梨的兩條S等位基因,通過生物信息學(xué)軟件分析確定這兩條S等位基因中有一條是新的,并命名為S34,在GenBank中的登錄號(hào)為DB269500。 2、利用3'RACE技術(shù)獲得了S13和S34
2、的3'端cDNA序列,通過分析比較將3'端cDNA序列與基因組DNA5'端序列拼接獲得全長(zhǎng)cDNA序列,在GenBank中的登錄號(hào)分別為S13(DQ414812)和S34(DQ414813)。分析確定S13和S34都包括687個(gè)堿基,編碼229個(gè)氨基酸,其中信號(hào)肽由27個(gè)氨基酸組成,保守區(qū)C1和C2都由11個(gè)氨基酸組成,C3由6個(gè)氨基酸組成,保守區(qū)RC4是薔薇科特有保守區(qū),由8個(gè)氨基酸組成,C5由7個(gè)氨基酸組成,高變區(qū)(HV)由15個(gè)氨
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