西瓜枯萎病菌和品種的遺傳多樣性研究.pdf

1、該研究旨在研究西瓜枯萎病菌和西瓜品種的遺傳分化,并尋找病菌遺傳分化和致病性分化、西瓜品種遺傳多樣性和抗病性之間的關(guān)系.該研究是在枯萎病菌專化型、致病型鑒定和西瓜品種抗病性鑒定的基礎(chǔ)上,一方面以河北省西瓜主產(chǎn)區(qū)的47個(gè)枯萎病菌和來(lái)自北京的1號(hào)生理小種、新疆的0號(hào)、2號(hào)生理小種為試材,采用RAPD分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)西瓜枯萎病菌的遺傳分化進(jìn)行了分析和討論;另一方面以48個(gè)來(lái)源和抗性不同的西瓜品種為試材,采用AFLP分子標(biāo)記技術(shù),對(duì)西瓜品種的遺傳

2、多樣性進(jìn)行了研究.1.采用完全隨機(jī)試驗(yàn),以病菌FON6為試材,建立了適合西瓜枯萎病菌的RAPD反應(yīng)體系:隨機(jī)引物濃度為10μmol/L,模板DNA濃度為40ng,Taq DNA聚合酶1.25U,10×buffer 2.5μL,2mmol/L dNTPs 1μL;同時(shí)對(duì)RAPD擴(kuò)增反應(yīng)中適宜的退火溫度進(jìn)行了探索,最終確定為37℃.2.對(duì)50個(gè)西瓜枯萎病菌進(jìn)行遺傳多樣性分析.結(jié)果表明,50個(gè)供試菌系兩兩之間的相似系數(shù)變化在0.45~0.93

3、之間,平均遺傳相似系數(shù)為0.71,可見(jiàn)西瓜枯萎病菌群體內(nèi)存在較豐富的遺傳變異.基于RAPD聚類分析表明,50個(gè)菌系可劃分為6個(gè)RAPD群(RAPD groups,簡(jiǎn)稱RGs),即RG Ⅰ、RGⅡ、RGⅢ、RGⅣ、RGⅤ和RGⅥ.其中RGⅥ又可劃分為7個(gè)亞群(RAPD subgroups.簡(jiǎn)稱RSGs),分別為RSG1、RSG2、RSG3、RSG4、RSG5、RSG6和RSG7.不同的RGs或RSGs含有的菌系數(shù)目不同,RG Ⅰ和RGⅡ僅

4、含有一個(gè)菌系,RGⅢ和RGⅤ分別包括兩個(gè)菌系,RGⅣ包括5個(gè)菌系,其余的菌系屬于RGⅥ;RSG1至RSG5各包括一個(gè)菌系,RSG4、RSG5各包括兩個(gè)菌系;RSG5包括19個(gè)菌系,且這19個(gè)菌系之間的親緣關(guān)系變異較大;RSG6共包括13個(gè)菌系,各菌系間的遺傳變異程度亦有所不同.該研究結(jié)果表明:(1)RAPD類群(或亞群)與病菌致病型間沒(méi)有明顯的相關(guān)性;(2)RAPD類群(或亞群)的劃分與菌系地理來(lái)源亦無(wú)明顯的相關(guān)性.3.11對(duì)引物對(duì)河北

5、省48個(gè)西瓜品種進(jìn)行的AFLP分析表明,48個(gè)品種之間的相似系數(shù)變化在0.32~0.95之間,平均相似系數(shù)為0.82,相似系數(shù)變化幅度大是品種特大京欣作用的結(jié)果,該品種的遺傳背景與其他47個(gè)品種明顯不同,若剔除特大京欣,則其余47個(gè)品種間的相似系數(shù)變化范圍為0.59~0.95,表明西瓜品種之間遺傳基礎(chǔ)狹窄.聚類分析結(jié)果表明,48個(gè)品種被劃分為6個(gè)類群(AGs),即類群AG Ⅰ、AG Ⅱ、AGⅢ、AGⅣ、AG Ⅴ和AGⅥ.其中AG Ⅰ、A