翡翠貽貝（Perna viridis）三個(gè)野生種群遺傳多樣性研究.pdf

1、翡翠貽貝(Perna viridis L)是生活在熱帶、亞熱帶沿海的附著型貝類，主要分布于太平洋和印度洋沿岸，在我國主要分布在東海南部及南海。它的繁殖能力強(qiáng)生長速度快，給當(dāng)?shù)匚锓N種質(zhì)資源帶來不同程度的影響，引起了許多學(xué)者的關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)以我國廣東汕尾、湛江，廣西北海三個(gè)自然種群翡翠貽貝為研究對(duì)象，應(yīng)用RAPD、ISSR和同功酶技術(shù)，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征，對(duì)翡翠貽貝三個(gè)種群的遺傳多樣性進(jìn)行了較系統(tǒng)的比較研究，結(jié)果表明： (一)貝殼形態(tài)學(xué)

2、特征方面： (1)殼長：北海種群分布范圍較大(54.32～124.42mm)，平均81.62mm；湛江群和汕尾種群則相對(duì)集中，湛江種群平均71.36mm；汕尾種群平均84.33mm。方差分析結(jié)果只有北海種群和汕尾種群之間差異不顯著。(2)殼高：三個(gè)種群主要分布區(qū)間為30～40mm，方差分析和多重比較顯示三個(gè)種群間差異不顯著。(3)殼寬：北海種群和湛江種群主要分布區(qū)間為15～25mm(分別為77％和96.87％)；汕尾種群主要分布

3、區(qū)間為20～30mm，(94％)。差異顯著性檢驗(yàn)顯示，北海種群和汕尾種群差異不顯著，湛江種群和另外兩個(gè)種群之間差異顯著。(4)韌帶長：主要分布區(qū)間為35～45mm，北海種群出現(xiàn)率只有48％；湛江和汕尾種群分別為89.58％和80％。北海種群和汕尾種群差異不顯著，湛江種群和汕尾種群差異顯著，和北海種群差異極顯著。(5)總重：北海種群主要分布區(qū)間20～40g(50％)；湛江種群主要分布區(qū)間為20～30g(57％)，汕尾種群主要分布區(qū)間為35

4、～45g(50％)。方差分析結(jié)果顯示北海種群和汕尾種群差異不顯著。(6)殼重：主要分布區(qū)間為lO～20g，北海種群出現(xiàn)率為56％，湛江種群出現(xiàn)率86.562％，汕尾種群出現(xiàn)率92％。方差分析和差異顯著性檢驗(yàn)結(jié)果顯示，北海種群和汕尾種群之間差異不顯著，而湛江種群和這兩個(gè)種群比較差異極顯著。 以殼長為變量，其他形態(tài)學(xué)特征都隨殼長增長而呈線性增長。決定系數(shù)和形態(tài)學(xué)參數(shù)變異系數(shù)方差分析結(jié)果顯示三個(gè)種群間相似度湛江種群和汕尾種群差異最小，

5、北海種群和汕尾種群差異最大。 (二)RAPD分子標(biāo)記檢測： 共篩選140個(gè)隨機(jī)引物，99個(gè)引物呈陽性反應(yīng)，應(yīng)用11種引物擴(kuò)增，擴(kuò)增片段長度在237～2154bp范圍內(nèi)，平均每個(gè)引物擴(kuò)增7.05個(gè)位點(diǎn)。通過統(tǒng)計(jì)分析表明：三個(gè)種群間多態(tài)位點(diǎn)比例北海(64.96％)>湛江(64.09％)>汕尾(63.12％)；遺傳多樣性指數(shù)北海(0.1901±0.0834)>湛江(0.1851±0.0825)>汕尾(0.1748±0.0822

6、)；種群問地遺傳距離GD<,BS>(0.0116)>GD<,zB>(0.0110)>GD<,ZS>(0.0059)。三個(gè)種群整體遺傳多樣性為：0.1886±0.0816。 (三)ISSR分子標(biāo)記檢測： ISSR分子標(biāo)記檢測到比RAPD更高的遺傳多樣性。篩選100個(gè)常用引物，有54個(gè)引物呈陽性反應(yīng)，10個(gè)引物分別以52℃和55℃兩個(gè)退火溫度擴(kuò)增，擴(kuò)增片段長度在218～2482bp范圍內(nèi)，平均每個(gè)引物在每一個(gè)個(gè)體擴(kuò)增出7.5

7、3個(gè)位點(diǎn)。多態(tài)位點(diǎn)比例湛江(79.10％)>北海(77.61％)>汕尾(76.87％)。遺傳多樣性指數(shù)北海(0.2534±0.0411)>汕尾(0.2462±0.0629)>湛江(0.2457±0.0444)；種群間的遺傳距離GD<,BS>(0.0479)>GD<,ZS>(0.0294)>GD<,zB>(0.0279)。三個(gè)種群整體遺傳多樣性為：0.2657±0.0421。 (四)同工酶檢測顯示： 用聚丙烯酰胺梯度凝膠電

8、泳檢測了消化腺組織的10種同工酶。在所分析的6種同工酶(ME、ALP、G6PDH、SDH、MDH、LDH)共9個(gè)座位具有多態(tài)性，多態(tài)位點(diǎn)的比例三個(gè)種群均為33.3％。群體總體多態(tài)位點(diǎn)75％。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明LKH-2為北海種群特有位點(diǎn)，為純合子；MKH-3在北海種群可以檢測到一個(gè)特征性位點(diǎn)，為純合子。G6PDH-2為湛江種群特有位點(diǎn)，為純合子：ME-2在北海和湛江種群為純合子，汕尾種群呈雜合子。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明基因分化系數(shù)北海種群和汕尾種群