紫杉醇半合成前體10-deacetyl bacctinⅢ組織培養(yǎng)和麗江獐牙菜成分研究.pdf

1、10—去乙酰巴卡亭Ⅲ（10—deacetyl baccatinⅢ）是從紅豆杉屬植物（Taxus）短枝葉中分離、提取得到的一種紫杉烷二萜類化合物，是目前臨床和科學(xué)研究用紫杉醇和多烯紫杉醇化學(xué)半合成的關(guān)鍵原料，在緩解紫杉醇資源短缺問題中起著不可替代的作用。 云南紅豆杉（Taxusyunnanensis）是分布在我國的主要紅豆杉樹種，也是我國現(xiàn)有幾種紅豆杉植物中紫杉醇和10—去乙酰巴卡亭Ⅲ（10—DABⅢ）含量較高的樹種。本論文研究了

2、云南紅豆杉生長點(diǎn)細(xì)胞懸浮培養(yǎng)系的建立方法，細(xì)胞培養(yǎng)物中10—DABⅢ的高效液相測定方法，細(xì)胞培養(yǎng)物中提取、分離10—DABⅢ的方法，對(duì)云南紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)10—DABⅢ的培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基主要成分、前體和稀土誘導(dǎo)子進(jìn)行了系統(tǒng)的研究；并探討了云南紅豆杉生長過程中不同部位10—DABⅢ含量變化情況。主要得到以下結(jié)論： 1、以云南紅豆杉生長點(diǎn)為外植體誘導(dǎo)愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過繼代培養(yǎng)、馴化，建立了性質(zhì)均一、性狀穩(wěn)定的云南紅豆杉

3、細(xì)胞株。 2、建立了高效液相法測定云南紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中10—DABⅢ含量的方法，該方法操作簡便，靈敏度高，重現(xiàn)性好，專屬性強(qiáng)，同時(shí)該方法還可以用于紅豆杉枝葉中10—DABⅢ含量的檢測。 3、從云南紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中提取、分離得到10—DABⅢ，并用薄層層析、高效液相法、核磁共振氫譜和碳譜對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定，證明從細(xì)胞培養(yǎng)物中提取、分離得到的10—DABⅢ與從天然紅豆杉植物中得到的10—DABⅢ為同一化合物。 4、

4、篩選出能夠促進(jìn)10—DABⅢ合成與釋放的培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件；從B5培養(yǎng)基主要成分氯化鈣、磷酸二氫鈉、硫酸銅、硫酸銨和硝酸鉀中篩選出能夠促進(jìn)10—DABⅢ合成與釋放的適宜濃度；從乙酸鈉、苯甲酸鈉兩種前體和硝酸鈰、硝酸鈰銨、硝酸鑭三種稀土誘導(dǎo)子中篩選出能夠促進(jìn)10—DABⅢ合成與釋放的適宜濃度。 5、初步探明了云南紅豆杉生長過程中不同部位10—DABⅢ含量的變化情況，休眠芽分化期是10—DABⅢ在枝葉中合成與積累的關(guān)鍵時(shí)期。