血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)THP-1源性巨噬細(xì)胞泡沫化機(jī)理研究.pdf

1、第一部分血管緊張素Ⅱ?qū)HP-1源性巨噬細(xì)胞膽固醇含量的影響 目的：將THP-1單核細(xì)胞株誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞，以THP-1源性巨噬細(xì)胞為研究對(duì)象，探討血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ，AngⅡ)對(duì)THP-1源性巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量的影響。 方法：用PMA將人源單核細(xì)胞株THP-1誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞，以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)溫孵育巨噬細(xì)胞48小時(shí)，同時(shí)分別加入不同濃度的AngⅡ及厄貝沙坦(Irbe

2、sartan，Irb)；采用酶法，通過(guò)HITACHI650-60型熒光分光光度計(jì)，以325nm為激發(fā)光波長(zhǎng)，415nm為熒光發(fā)射波長(zhǎng)，檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)、外膽固醇含量的變化。 結(jié)果：AngⅡ能引起THP-1源性巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量顯著增高(p＜0.05)、并成濃度依賴性；AngⅡ受體拮抗劑Irb能顯著減少細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量(p＜0.05)。 結(jié)論：AngⅡ可引起THP-1源性巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇含量顯著增高，促進(jìn)泡沫細(xì)胞形成，加速動(dòng)脈

3、粥樣硬化。 第二部分血管緊張素Ⅱ?qū)HP-1源性巨噬細(xì)胞ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A1表達(dá)的影響 目的：將THP-1單核細(xì)胞株誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞，建立細(xì)胞模型作為研究對(duì)象，探討血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ，AngⅡ)對(duì)THP-1源性巨噬細(xì)胞ABCA1的表達(dá)調(diào)控作用。 方法：用PMA將人源單核細(xì)胞株THP-1誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞，以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)溫孵育巨噬細(xì)胞48小時(shí)，同時(shí)分別加入不同濃

4、度的AngⅡ及Irb；運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和Westernblot分別檢測(cè)ABCA1mRNA與ABCA1蛋白的表達(dá)的變化。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)顯示，不同濃度的AngⅡ(10-7、10-6、10-5mol/L)引起ABCA1表達(dá)的變化，與對(duì)照組及組間相比，均有較顯著差異，并成濃度依賴性。RT-PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，mRNA表達(dá)分別下降(10.5±1.9)％、(22.6±5.3)％、(44±3.7)％，Weste