熱休克蛋白70對(duì)離體大鼠供心保護(hù)作用研究.pdf

1、目的：研究熱休克蛋白70(HSP70)對(duì)大鼠供心的保護(hù)作用，并探討其作用機(jī)制。 方法：雄性Wistar大鼠18只，體重250～350 g，隨機(jī)分為2組：對(duì)照組(C，n=9)：腹腔注射生理鹽水0.5 ml，注射后24 h取離體心臟，灌注康斯特(Histidine-tryptophan-ketoglutarate，HTK)心肌保護(hù)液，儲(chǔ)存于4℃保存液中3 h，然后建立Langendorff離體心臟灌注模型，灌注Krebs—Hense

2、leit(K—H)液2 h。實(shí)驗(yàn)組(E，n=9)：腹腔注射重酒石酸去甲腎上腺素(溶于生理鹽水中)3.1μ mol/kg(0.53 mg/kg)， 24 h后取離體心臟，余處理步驟同C組。心臟灌流結(jié)束后取左室心肌組織測定心肌HSP70含量以及相關(guān)生化指標(biāo)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)含量、肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)漏出率以及心肌含水量(MWC)。采用TUNEL法測定心肌組織

3、細(xì)胞凋亡，采用免疫組織化學(xué)法測定心肌細(xì)胞凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表達(dá)，并觀察心肌超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果：E組大鼠供心心肌細(xì)胞HSP70含量明顯高于C組(t=17.96，P<0.01)。生化指標(biāo)E組明顯優(yōu)于C組：LDH和CK10 min漏出率、MWC、MDA含量E組較C組明顯降低(t=4.13～15.81，P<0.01)，SOD活性、NO、NOS含量E組明顯高于C組(t=4.96～10.89，P<0.01)，E組心肌細(xì)胞凋亡率明顯低

4、于C組(t=7.066，P<0.01)，凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)E組高于C組(t=5.217，P<0.01)，Bax表達(dá)E組低于C組(t=9.883，P<0.01)。兩組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)均有改變，C組結(jié)構(gòu)改變較E組明顯。 結(jié)論：通過重酒石酸去甲腎上腺素誘導(dǎo)供心心肌熱休克蛋70的高表達(dá)，可發(fā)揮其對(duì)供心缺血再灌注時(shí)的保護(hù)作用，改善供心心肌的結(jié)構(gòu)和功能。HSP70可通過降低心肌MDA水平、提高SOD活性來增強(qiáng)心肌自身抗氧化損傷的能力，通