黃酮類(lèi)中藥單體柚皮素抑制破骨細(xì)胞的研究.pdf

1、破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收和成骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨形成間的動(dòng)態(tài)平衡和偶聯(lián)維持著骨代謝的穩(wěn)定。骨破壞主要由于破骨細(xì)胞數(shù)目增多或功能增強(qiáng)引起的過(guò)度骨吸收所致，過(guò)度骨吸收常導(dǎo)致一些疾病的發(fā)生，如：假體周?chē)侨芙?、骨質(zhì)疏松癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨髓瘤等。破骨細(xì)胞是體內(nèi)唯一吸收骨質(zhì)的細(xì)胞，因此靶向抑制破骨細(xì)胞是預(yù)防和治療這類(lèi)疾病最有效的策略之一。目前對(duì)于治療這類(lèi)疾病的藥物可選擇的種類(lèi)較少，副作用也較多。因此，開(kāi)發(fā)更多副作用更少的治療藥物是非常有必要的。

2、　　黃酮類(lèi)化合物是很多可食用植物體內(nèi)自然出現(xiàn)的化合物，它具有抗感染，殺菌，抗過(guò)敏，抗氧化自由基，抗腫瘤等功能。柚皮素屬于黃酮類(lèi)化合物。在體外試驗(yàn)中，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)柚皮素有促成骨作用和抑制破骨作用。但柚皮素抑制破骨細(xì)胞的作用機(jī)制以及在體內(nèi)能否抑制骨破壞，到目前為止仍未見(jiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道。
　　本課題以柚皮素為研究對(duì)象，主要研究?jī)?nèi)容包括以下三部分：
　　1.柚皮素在體外對(duì)破骨細(xì)胞的影響。
　　2.柚皮素在體外對(duì)破骨細(xì)胞的作用機(jī)制。

3、
　　3.柚皮素在體內(nèi)對(duì)小鼠顱骨骨溶解模型的作用。
　　在本研究中，我們采用CCK-8方法來(lái)評(píng)估黃酮類(lèi)中藥單體柚皮素的毒性大小。運(yùn)用抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，免疫熒光染色和骨片吸收效果實(shí)驗(yàn)證明了柚皮素在體外對(duì)破骨細(xì)胞生成起到抑制效果。采用Real-time-PCR，Western Blot和熒光素酶報(bào)告基因技術(shù)，我們證明了柚皮素通過(guò)抑制RANKL介導(dǎo)的p38信號(hào)途徑，抑制了破骨細(xì)胞的形成。運(yùn)用體內(nèi)動(dòng)物模型，我們證實(shí)