中國部分地區(qū)豬鏈球菌遺傳背景及進化關(guān)系研究.pdf

1、設(shè)計了特異性引物對3個致病性豬鏈球菌2型(SS2)四川分離株4個主要毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2分別進行了擴增，序列測定與分析結(jié)果表明3個SS2四川分離株均存在4個毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2，其核苷酸序列與1998年江蘇分離株9801及國外參考菌株的同源性均大于99.5％，提示3個四川分離菌株與1998年江蘇流行的高毒力菌株可能具有共同的來源。 應(yīng)用多位點序列分型技術(shù)(MLST)結(jié)合豬鏈球菌現(xiàn)有

2、毒力因子基因gdh、cps、mrp(mrp*)、 epf(epf*)、sly、orf2、fbps、gapdh基因分布的PCR檢測，對來源于發(fā)病豬、健康豬扁桃體和發(fā)豬鏈球菌病病人的41株豬鏈球菌1/2，2，7，9型國內(nèi)流行菌株進行了基因分型。結(jié)果發(fā)現(xiàn)了2個在國際上未報道的ST型——STN1和STN2，41株菌分布于10個基因型(由8個ST型和9種毒力基因型組合而成)，其中流行最廣的豬鏈球菌菌株為2型中的ST7/A1型(74.2％，23/3

3、1)，毒力基因型為gdh+/cps2+/mrp+/epf+/sly+/orf2+/fbps+/gapdh+;且ST7型菌株與發(fā)病豬分離的臨床背景高度相關(guān)，ST7占發(fā)病豬分離菌株的84.6％(22/26)；健康豬分離的菌株基因型與發(fā)病豬分離的基因型差異明顯；通過菌株MLST型別，繪制了我國流行的豬鏈球菌菌株的遺傳進化圖譜。 為了了解重慶豬鏈球菌流行情況，掌握其流行病學(xué)規(guī)律，隨機采集重慶市20個區(qū)縣定點屠宰場的腭扁桃體1360份和

4、116份發(fā)病豬實質(zhì)器官，進行豬鏈球菌分離。應(yīng)用溶血特性、PCR方法和凝集試驗對分離菌株進行篩選及豬鏈球菌種、型鑒定。應(yīng)用PCR方法對定型的豬鏈球菌進行毒力因子檢測，并應(yīng)用多位點序列分型技術(shù)(MLST)進行分型，同時與2005年和2006年重慶地區(qū)已分離的豬鏈球菌進行比較。結(jié)果共分離豬鏈球菌菌株230株，其中2型4株，7型3株，9型2株，并在國內(nèi)首次分離出2株豬鏈球菌1/2型。毒力因子檢測和MLST分型結(jié)果表明，重慶豬扁桃體分離的2型菌株