造血干細胸采集、分離與凍存的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究外周血造血干細胞的采集、分離、凍存及干細胞活性的檢測.方法:我們用臍血干細胞作為研究對象.用封閉式動脈采血法采集10例臍血,經Ficoll法分離,取白細胞層重懸于10ml RPMI 1640培養(yǎng)液中作為樣本,對樣本作單核細胞計數(MNC),胎盼蘭拒染試驗及流式細胞儀CD34+細胞計數.將樣本分裝在18個冷凍管內,分成3組,分別用10﹪DMSO、自配的5﹪DMSO+6﹪HES+4﹪人體白蛋白及CP-1三種不同的冷凍保存液凍存于-

2、196℃的液氮和-180℃的低溫冰箱中,冷凍時間為1個月、3個月和6個月.對冷凍后的樣本進行MNC計數.胎盼蘭拒染試驗及流式細胞儀CD34+細胞計數.取5例未冷凍的樣本稀釋成細胞數<10<'6>/ml,進行流式細胞儀計數.所得結果作統(tǒng)計學分析.結論:我們認為自配的冷凍保存液效果良好,完全可以適應我們的臨床應用,且其對造血干細胞的保護作用可與國外產品媲美,回輸后的毒付作用小.短期造血干細胞的凍存可以在-80℃低溫冰箱內進行,對細胞活性影響

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