A23187誘導(dǎo)來源于急性髓細(xì)胞白血病樹突狀細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文A23187誘導(dǎo)來源于急性髓細(xì)胞白血病樹突狀細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究姓名：李偉平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：宋振嵐20050601提供一條新途徑，也為AML自體于細(xì)胞移植提供一種行之有效的體外凈化方法。方法：用密度梯度比重離心法分離8例初發(fā)的AML患者骨髓單個核細(xì)胞，以每孔1106個細(xì)胞在24孑L板內(nèi)液態(tài)培養(yǎng)，共分3組培養(yǎng)，CI組：A23187加入含10％人AB血清的RPMll640培養(yǎng)液(完全培養(yǎng)液)；CK組

2、：GMCSF][L一4加入完全培養(yǎng)液；對照組僅含完全培養(yǎng)液。培養(yǎng)4天，倒置顯微鏡及細(xì)胞化學(xué)染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化，流式細(xì)胞儀測定培養(yǎng)前后細(xì)胞CD83、CDl4、CDWl23、HLADR免疫表型的變化；混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)采用MTT比色法測定DC刺激同種異體T淋巴細(xì)胞增殖能力；并比較A23187誘導(dǎo)的DC激活的T細(xì)胞與IL2激活的T細(xì)胞的殺傷自身白血病細(xì)胞活性的異同。結(jié)果：1培養(yǎng)四天后，CI組和CK組細(xì)胞有相似的變化，細(xì)胞體積變大，形態(tài)由圓形變

3、為不規(guī)則形，細(xì)胞周圍出現(xiàn)樹突狀偽足。cI誘導(dǎo)組與CK組相比，細(xì)胞體積更大，細(xì)胞周圍樹枝狀突起更明顯。CI組出現(xiàn)上述變化的細(xì)胞占30％～60％左右，而CK組不足30％，對照組細(xì)胞生長緩慢，且形態(tài)變化不大，未見樹突樣細(xì)胞出現(xiàn)。2DC的免疫表型測試中CI組和CK組與對照組相比CDwl23、HLADR表達(dá)明顯上調(diào)，CDl4表達(dá)下調(diào)。DC成熟特異性標(biāo)記CD83在CI組明顯上調(diào)，但是CK組CD83無變化。3A23187誘導(dǎo)的DC對同種異體T淋巴細(xì)胞

4、刺激作用遠(yuǎn)高于CK組及對照組，且隨DC細(xì)胞數(shù)量的增加刺激T淋巴細(xì)胞增殖的活性增強(qiáng)。4CTL活性測試中可見A23187誘導(dǎo)的AMLDC刺激自體T細(xì)胞使其抗自身白血病的活性明顯增強(qiáng)。當(dāng)效靶比例為50：1時，A23187誘導(dǎo)的AMLDC激活的T細(xì)胞與IL，2激活的T細(xì)胞其抗自身白血病的活性有明顯的差異(P005)。結(jié)論：1利用單一試劑鈣離子載體A23187，體外可以將AML細(xì)胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化為形態(tài)、表型和功能上符合DC特征的細(xì)胞。2cI組誘導(dǎo)AML