枯草芽孢桿菌LD-8547溶栓酶溶栓效果初步研究.pdf

1、隨著物質生活水平的提高,血栓疾病也越來越威脅人類的健康和生命,并且會引發(fā)嚴重的后果。微生物溶栓酶是一類具有良好應用前景的溶栓酶,不僅能夠大量生產,還能彌補傳統(tǒng)溶栓劑的缺點。本實驗室已從豆豉中分離出一株具有產高纖溶活性的溶栓酶的菌株,命名為枯草芽孢桿菌LD-8547。
　　 本實驗經過發(fā)酵、鹽析、透析、濃縮等步驟得到粗酶液,再用Sephadex G-100凝膠分子篩柱純化豆豉溶栓酶,得到分子量約為31 kDa的單一條帶,純化后測得

2、酶活為21750 U／mL。通過豆豉溶栓酶對優(yōu)球蛋白凝塊的溶解試驗,表明溶栓酶(469 U)能顯著溶解優(yōu)球蛋白凝塊,并具有劑量依賴性。
　　 通過對豆豉溶栓酶急性毒性的初步研究,結果表明小鼠灌胃給藥溶栓酶691586 U／Kg,發(fā)現給藥小鼠與空白對照組情況相似,兩周內均無死亡,小鼠解剖后,各臟體比均與對照組無顯著差異,說明溶栓酶的口服灌胃LD50遠大于691586 U／Kg。小鼠連續(xù)灌胃給藥豆豉溶栓酶一周,測定體內出血時間、體外

3、凝血時間、全血塊及全血漿凝塊溶解作用。結果表明,溶栓酶(4412 U)對小鼠出血、凝血時間有一定延長作用,溶栓酶(8200 U)能明顯提高血塊的溶解率,而溶栓酶(4100 U)能明顯提高血漿凝塊的溶解率,并隨劑量的提高而作用加強。
　　 通過角叉菜膠誘發(fā)小鼠尾部血栓及兔頸動脈血栓的溶解試驗,表明豆豉溶栓酶(2051 U)對小鼠尾靜脈血栓形成平均長度有一定影響,并隨劑量增大抑制血栓形成的作用增強。溶栓酶(1035 U／kg)對兔頸