MK反義寡核苷酸對(duì)宮頸鱗癌Hela229細(xì)胞中MK表達(dá)影響的研究.pdf

1、10459公開文學(xué)論大位州學(xué)鄭士碩(科學(xué)學(xué)位)MK反義寡核昔酸對(duì)宮頸鱗癌Hela229細(xì)胞中MK表達(dá)影響的研究院系名稱:鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)專業(yè)名稱:病理學(xué)與病理生理學(xué)作者姓名:王向紅導(dǎo)師姓名、職稱:陳奎生教授李最磊博士二零零九年一月鄭州大學(xué)2(X)9屆碩十研究生畢業(yè)論文MK反義寡核普酸對(duì)宮頸鱗箱Hela229細(xì)胞中以表達(dá)形響的研究材料和方法1.材料60例宮頸鱗癌組織、29例CIN組織及48例正常宮頸組織為平煤集團(tuán)公司總醫(yī)院

2、及鄭州大學(xué)三附院2004年3月至2008年12月間手術(shù)切除標(biāo)本人宮頸鱗癌Hela229細(xì)胞由中科院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所提供。2.方法(1)采用免疫組織化學(xué)、原位雜交技術(shù)檢測(cè)宮頸鱗癌組織、CIN組織及正常宮頸組織中MK蛋白及mRNA表達(dá)(2)設(shè)計(jì)合成2條MK反義寡核昔酸(ASODN:、ASOD從)及1條無關(guān)序列寡核昔酸(N一ODN)(3)分別采用150林歲ml、200卜留ml、250林歲ml3種不同濃度的MKAsoDN、ASODN:和N一

3、ODN體外分組轉(zhuǎn)染培養(yǎng)的Hela229細(xì)胞48h和72h。另設(shè)細(xì)胞空白對(duì)照(不進(jìn)行任何操作)(4)采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法及完整細(xì)胞原位雜交方法觀察MKASODN對(duì)Hela229細(xì)胞中MK蛋白和mRNA表達(dá)的影響。(5)運(yùn)用sPSs11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。陽性率之間的比較采用x’檢驗(yàn):計(jì)量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(X士S)表示，兩組均數(shù)的比較運(yùn)用兩樣本t檢驗(yàn)(只est)兩組以上均數(shù)比較采用方差分析(ANVOA)以a=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。結(jié)

4、果1.MK蛋白及mRNA的表達(dá):MK蛋白及m丑NA在宮頸鱗癌組織、CIN組織中存在表達(dá)，而在正常宮頸組織中未見表達(dá)。蛋白陽性染色位于宮頸鱗癌組織及CIN組織細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)中，呈棕黃色顆粒MKmRNA定位于宮頸鱗癌組織及CIN組織細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，呈藍(lán)紫色顆粒。2.免疫組織化學(xué)結(jié)果:正常宮頸上皮組織、CIN組織及宮頸鱗癌組織中MK的蛋白陽性表達(dá)率分別為0.000，0(0’s)、20.690，0(629)和65.000，0(39巧。)。x’檢