養(yǎng)殖水貂阿留申病感染情況及分子流行病學(xué)的研究.pdf

1、應(yīng)用對(duì)流免疫電泳(CIEP)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)方法，對(duì)在打皮期從我國主要水貂養(yǎng)殖區(qū)——山東、遼寧和黑龍江3地，隨機(jī)采集的38、42和30份水貂樣本的ADV感染情況，進(jìn)行了對(duì)比檢測(cè)。兩種方法檢測(cè)得到的三地ADV感染陽性率，分別為50.0％、42.8％、66.67％和63.16％、54.76％、86.67％。兩組存在差異的檢測(cè)結(jié)果，均可在一定程度上說明國內(nèi)養(yǎng)殖水貂群AD的高感染率；同時(shí)，也可反映出CIEP法用于AD檢測(cè)時(shí)存在的誤差。

2、 對(duì)通過PCR方法檢測(cè)得到的ADV感染陽性母貂的產(chǎn)仔情況，進(jìn)行了跟蹤觀察；并使用PCR方法對(duì)仔貂分窩時(shí)感染ADV的情況進(jìn)行了檢測(cè)。總結(jié)觀察、檢測(cè)結(jié)果，可得到以下結(jié)論：1，ADV感染陽性母貂產(chǎn)仔的數(shù)量少，死胎數(shù)及發(fā)育不良的幼仔數(shù)要明顯高于ADV陰性貂。2，實(shí)驗(yàn)中，ADV感染陽性母貂所產(chǎn)幼仔分窩時(shí)感染ADV的比例為100％。 有關(guān)AD分子流行病學(xué)研究中，首先對(duì)從山東、遼寧和黑龍江3地分離到的16株ADV毒株VP2基因上的，以

3、超變區(qū)為核心區(qū)域的基因片斷，進(jìn)行了PCR擴(kuò)增、克隆和序列測(cè)定。借助核酸分析軟件，對(duì)獲得的該16株ADV的序列與ADV-G、ADV-Utah1及ADV-K等幾株國外代表性參考毒株的序列進(jìn)行了比較。在比較分析的基礎(chǔ)上，初步探討了國內(nèi)ADV分離株基因型的劃分，及它們與國外參考株間的遺傳進(jìn)化關(guān)系，并可得到以下結(jié)論：1.多數(shù)ADV國內(nèi)分離株基因型可劃歸為Ⅱ或Ⅲ型，它們具有與歐美參考株較近的親緣關(guān)系，國內(nèi)AD源于引種的可能性很大；2.國內(nèi)ADV存在

4、高度遺傳多樣性。ADV-DL1、ADV-DL2這兩株核酸缺失株，以及與國外參考株存在明顯核酸和推導(dǎo)的氨基酸序列差別的ADV-DL5株，可能為國內(nèi)ADV中明顯有別于歐美參考株的基因型株。其次，對(duì)ADV-DL1、ADV-DL2核酸缺失株和ADV-DL5株這3株國內(nèi)分離株VP2基因上與致病力相關(guān)的基因片斷，進(jìn)行了擴(kuò)增、克隆和序列測(cè)定，并與國外參考株進(jìn)行了對(duì)比分析。結(jié)果表明：ADV-DL1、ADV-DL2和ADV-DL5國內(nèi)分離株與國外參考株，

5、在與致病力相關(guān)基因區(qū)上整體變異不大，同源率在93.6％-96.0％之間。ADV-DL1、ADV-DL2和ADV-DL5與國外參考株相對(duì)比，均存在特有的氨基酸突變位點(diǎn)。ADV-DL1、ADV-DL2的突變位點(diǎn)相對(duì)較少(分別為5和6處)，且根據(jù)突變氨基酸的性質(zhì)，推斷它們對(duì)VP2蛋白空間結(jié)構(gòu)產(chǎn)生較大影響的可能性不大。ADV-DL5與國外參考株間氨基酸突變位點(diǎn)相對(duì)較多，共有10處，且其中幾處氨基酸的改變可能對(duì)VP2蛋白空間結(jié)構(gòu)產(chǎn)生較大的影響。而