基于流式細胞術(shù)的類風濕關(guān)節(jié)炎實驗研究.pdf

1、目的：建立外周血T淋巴細胞TCR亞家族檢測方法，研究TCR亞家族檢測的臨床意義，并在此基礎上探討有效的中藥復方可能的作用機制。
　　方法：根據(jù)抗原-抗體特異性結(jié)合的基本免疫學原理，利用多重抗體熒光染色技術(shù)，通過流式細胞儀檢測分析CD3、CD4、CD8、CD95、CD69、TCR、Annexin V等標志性抗體的光電信號強度，建立設門策略，對外周血中的淋巴細胞進行檢測分析。通過不同的臨床分組，對該方法所檢指標的臨床意義進行討論。在此

2、基礎上對確有療效的中藥復方的可能作用機制進行研究。
　　結(jié)果：⑴正常人群外周血中T淋巴細胞各TCR亞家族細胞所占比例不同，但各群細胞都可被檢測。⑵正常人群外周血中，與Annexin V分子結(jié)合的T淋巴細胞中CD95+CD69+T所占比例最高。⑶類風濕關(guān)節(jié)炎的患者，外周血T淋巴細胞TCR亞家族中Vβ12、Vβ20及CD4+Vβ9亞家族細胞所占比例與正常人群相比差異明顯（P<0.05）,與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者相比CD8+Vβ14、C8+

3、Vβ4所占比例與正常人群相比差異明顯（P<0.05）；外周血T淋巴細胞中，CD95+T細胞、CD69+T細胞所占比例與正常人群相比無明顯差異（P>0.05），與系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者相比差異明顯（P>0.05）。⑷不同病程階段的類風濕關(guān)節(jié)炎患者外周T血淋巴細胞TCR亞家族中，Vβ12亞家族細胞所占比例差異明顯（P<0.05）。⑸中藥復方治療前后，類風濕關(guān)節(jié)炎患者外周血T淋巴細胞TCR亞家族中，Vβ7.1、Vβ18、Vβ8、Vβ14等亞家族所

4、占比例的變化差異明顯（P<0.05）；外周血淋巴細胞中，與Annexin V分子結(jié)合的T淋巴細胞中CD95+CD69+T所占比例及CD95+T細胞中結(jié)合Annexin V分子的細胞所占比例變化差異明顯（P<0.05）。
　　結(jié)論：①正常人群外周血中T淋巴細胞各TCR亞家族均有分布。②正常人群中，F(xiàn)as途徑誘導的細胞凋亡是T淋巴細胞發(fā)生凋亡的主要機制。③不同疾病，外周血中T淋巴細胞各TCR亞家族的分布不同，Vβ12、Vβ20、CD4