神經(jīng)突觸核蛋白-γ(SNCG)對(duì)肝癌細(xì)胞抗微管藥物作用效果的影響及其相關(guān)機(jī)制初探.pdf

1、原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌(HCC)是中國最常見的惡性腫瘤之一,每年死亡率位居癌癥總死亡率的前三位。目前,紫杉醇(PTX)和長春新堿(VCR)等抗微管藥物作為一種以微管蛋白為靶點(diǎn)的細(xì)胞周期特異性藥物,已廣泛應(yīng)用于臨床治療中晚期肝癌的轉(zhuǎn)移和術(shù)后復(fù)發(fā)。然而此類藥物對(duì)肝癌患者的療效差別很大,重要原因是肝癌細(xì)胞對(duì)抗微管藥物產(chǎn)生耐藥。因此,發(fā)現(xiàn)影響抗微管藥物作用的細(xì)胞內(nèi)因子具有重要意義。神經(jīng)突觸核蛋白家族成員synuclein-γ(SNCG)在肝癌組織中高

2、表達(dá),而且表達(dá)水平同肝癌病理分級(jí)呈正相關(guān)。SNCG可以抑制細(xì)胞有絲分裂檢查點(diǎn)的重要激酶BubR1的功能,導(dǎo)致不正常的細(xì)胞分裂。因此,SNCG在肝癌細(xì)胞中通過抑制有絲分裂檢查點(diǎn)正常激活的機(jī)制可能降低肝癌細(xì)胞對(duì)抗微管藥物的敏感性,影響抗微管藥物的藥效。
　　 為了研究SNCG對(duì)肝癌細(xì)胞抗微管藥物作用效果的影響及其分子作用機(jī)制,我們采用人肝癌細(xì)胞株SMMC-7721和HepG2穩(wěn)定過表達(dá)synuclein-γ(SNCG)模型,在細(xì)胞水

3、平檢測(cè)SNCG作為預(yù)測(cè)抗微管藥物治療肝癌療效的分子標(biāo)志物及其肝癌治療新靶點(diǎn)的可能性以及意義。SNCG在肝癌組織和肝癌細(xì)胞中普遍高表達(dá)。實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time RT-PCR)和蛋白免疫印跡(Western blotting)法檢測(cè)均證實(shí)構(gòu)建的SNCG過表達(dá)細(xì)胞模型中其mRNA和蛋白表達(dá)水平顯著增加。經(jīng)PTX或VCR分別處理,其對(duì)SNCG過表達(dá)肝癌細(xì)胞的生長抑制作用明顯降低。SNCG過表達(dá)能夠降低抗微管藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞有絲分裂期阻

4、滯,肝癌細(xì)胞SMMC-7721和HepG2對(duì)PTX、VCR的藥物敏感性顯著降低。全基因組表達(dá)譜芯片檢測(cè)結(jié)果提示,SNCG能夠影響包括細(xì)胞周期、細(xì)胞骨架調(diào)節(jié)、細(xì)胞遷移及細(xì)胞耐藥等多條細(xì)胞調(diào)節(jié)通路,與其相關(guān)的基因(AREG,EREG,ATF3,MMP2,DUSP5,ALDH3A1,IGFBP1,IFI16)表達(dá)變化均受SNCG的影響。
　　 綜合實(shí)驗(yàn)結(jié)果,SNCG在肝癌細(xì)胞過表達(dá)后可顯著降低其對(duì)抗微管藥物的敏感性,在肝癌化療中SNC