糞便tumor M2-PK、COX-2 mRNA檢測對結(jié)直腸癌篩查的臨床意義.pdf

1、結(jié)直腸癌已成為嚴(yán)重影響我國人民健康的常見惡性腫瘤之一，其發(fā)病率呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢。從疾病防治的角度來看，大規(guī)模人群結(jié)直腸癌篩查無疑具有巨大的社會經(jīng)濟(jì)價值，但目前對結(jié)直腸癌篩查尚缺乏高敏感性、高特異性、高依從性、低費用的篩查方法。既有的研究表明，應(yīng)用糞便標(biāo)本篩查結(jié)直腸癌具有較好的臨床便利性，而傳統(tǒng)糞便潛血試驗篩查的敏感性和特異性均低，因此尋找新穎的高敏感性、高特異性的糞便腫瘤標(biāo)志物以篩查結(jié)直腸癌顯得甚為必要。已有研究表明腫瘤M2型丙酮酸激

2、酶(tumorM2-PK)和環(huán)氧合酶2(COX-2)均是結(jié)直腸癌組織中高度表達(dá)的腫瘤標(biāo)志物，但其在糞便中的水平如何，是否可作為糞便標(biāo)本篩查結(jié)直腸癌的腫瘤標(biāo)志物尚未完全明確；另外，糞便tumorM2-PK、COX-2mRNA篩查效率與傳統(tǒng)的糞便潛血試驗比較效果如何，以及聯(lián)合篩查是否具有較高的臨床價值均是值得進(jìn)一步探討的問題。 第一章糞便腫瘤M2型丙酮酸激酶檢測結(jié)直腸癌的研究目的：探討糞便腫瘤M2型丙酮酸激酶(tumorM2-PK)

3、篩查結(jié)直腸癌的效率，及其聯(lián)合潛血試驗篩查結(jié)直腸癌的臨床意義。 方法：連續(xù)收集43例結(jié)直腸癌病人和43例健康正常人的糞便標(biāo)本各1份，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)檢測標(biāo)本的tumorM2-PK水平，同時行免疫法糞便潛血試驗(IFOBT)檢測，比較二者單獨及聯(lián)合篩查結(jié)直腸癌的效率，并分析tumorM2-PK水平與腫瘤的直徑、部位、組織分化程度、Dukes分期等因素的關(guān)系。非參數(shù)資料及計數(shù)資料比較采用兩獨立樣本秩和檢驗、多個樣本

4、秩和檢驗或x2檢驗，不同方法檢測的敏感性和特異性比較采用受試者工作特征曲線(ReceiverOperatingCharacteristics(ROC)Curves)，所有數(shù)據(jù)利用SPSS10.0統(tǒng)計軟件完成。 結(jié)果：糞便tumorM2-PK水平的中位值(最大值，最小值)：結(jié)直腸癌組為8.6(0，59.0)U/mL，健康對照組為0.6(0，9.0)U/mL，兩組比較差異有顯著性意義(U=319，P＜0.01)。 糞便tum

5、orM2-PK檢測結(jié)直腸癌的ROC曲線下面積為0.827，95％置信區(qū)間為(0.736，0.919)，表明糞便tumorM2-PK對檢測結(jié)直腸癌具有較好的診斷價值。 不同大小、位置、分化程度、Dukes分期的結(jié)直腸癌的糞便tumorM2-PK水平無顯著性差異(P＞0.05)。糞便tumorM2-PK、IFOBT及二者聯(lián)合檢測結(jié)直腸癌的敏感性和特異性分別為65.1％和88.4％、69.7％和81.4％、88.4％和76.7％。tu

6、morM2-PK的篩查敏感性與IFOBT比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=0.212，P=0.645)，二者聯(lián)合檢測的敏感性高于IFOBT單獨檢測的敏感性(x2=4.497，P=0.034)。 結(jié)論： 1.糞便tumorM2-PK作為腫瘤標(biāo)志物對結(jié)直腸癌篩查具有較好的臨床價值。 2.糞便tumorM2-PK的水平與結(jié)直腸癌的位置、分化程度無顯著相關(guān)，是否與Dukes分期正相關(guān)尚需進(jìn)一步研究。 3.糞便tumor

7、M2-PK、免疫法潛血試驗檢測結(jié)直腸癌具有相近的效率，二者聯(lián)合可明顯提高檢測的敏感性。 第二章糞便COX-2mRNA檢測結(jié)直腸癌的研究目的：探討糞便COX-2mRNA的篩查結(jié)直腸癌的效率，及其聯(lián)合潛血試驗對結(jié)直腸癌篩查的臨床意義。 方法：連續(xù)收集43例結(jié)直腸癌病人和39例健康正常人的糞便標(biāo)本各1份，采用巢式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(netRT-PCR)的方法檢測糞便中脫落細(xì)胞COX-2mRNA的表達(dá)水平，比較糞便COX-2mR

8、NA和免疫法糞便潛血試驗(IFOBT)單獨及聯(lián)合篩查結(jié)直腸癌的效率，并分析COX-2mRNA表達(dá)與腫瘤的直徑、部位、組織分化程度、Dukes分期等因素的關(guān)系。實驗數(shù)據(jù)比較采用兩獨立樣本秩和檢驗、x2檢驗或t檢驗；不同方法檢測效率比較采用ROC曲線，所有數(shù)據(jù)均用SPSS10.0統(tǒng)計軟件處理。。 結(jié)果：結(jié)直腸癌組收獲糞便總RNA的中位數(shù)為49μg(9～313μg)，對照組收獲糞便總RNA的中位數(shù)為46μg(6～283μg)，兩組比較

9、差異無顯著性意義(U=768,P=0.513) 43例結(jié)直腸癌糞便中有27例COX-2mRNA表達(dá)呈陽性，陽性率62.8％；39例正常對照組中有6例COX-2mRNA表達(dá)呈陽性，陽性率15.4％，檢出率差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(x2=19.112，P＜0.01)。 糞便COX-2mRNA檢測結(jié)直腸癌的ROC曲線下面積為0.737，95％置信區(qū)間為(0.627，0.847)，表明糞便COX-2mRNA對檢測結(jié)直腸癌具有較好的診

10、斷價值。 直腸癌的COX-2mRNA檢測陽性率為82.6％，左半結(jié)腸的陽性率為55.6％，右結(jié)腸的陽性率27.3％，不同腫瘤部位的糞便COX-2mRNA檢測陽性率差異比較有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=10.255，P=0.006)。而不同腫瘤直徑、組織分化程度、腫瘤分期的糞便COX-2mRNA檢測陽性率均無顯著性差異(P＞0.05)。 糞便COX-2mRNA檢測的敏感性與IFOBT比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=0.469，P=0.

11、494)；特異性差異也無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=0.348，P=0.555)；而COX-2mRNA+IFOBT聯(lián)合檢測的敏感性與IFOBT的比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=5.939，P=0.015)，特異性差異比較無統(tǒng)計學(xué)意義(x2=1.076，P=0.300)。 結(jié)論： 1.COX-2mRNA可作為一種腫瘤標(biāo)志物在糞便中檢出，其對檢測結(jié)直腸癌具有較好的診斷價值。 2.糞便COX-2mRNA的檢出率與結(jié)直腸癌位置顯著相關(guān)