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1、目的:研究生長(zhǎng)抑素思他寧在體外對(duì)胃癌細(xì)胞株SGC-7901生長(zhǎng)抑制作用,探討其作用機(jī)制。 方法:使用生長(zhǎng)抑素思他寧溶液,按不同濃度(10-10mol/L、10-9mol/L、10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)處理對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的胃癌細(xì)胞株SGC-7901,倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。MTT比色法測(cè)量吸光度A值,計(jì)算對(duì)照組和各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率;流式細(xì)胞儀對(duì)思他寧作用后的SGC-7901細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞周期分
2、析,計(jì)算細(xì)胞凋亡率:免疫細(xì)胞化學(xué)(SP)法檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中VEGF、NFkB蛋白的表達(dá)變化;RT-PCR半定量檢測(cè)SGC-7901細(xì)胞VEGF、NFkB mRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果 MTT比色法顯示思他寧對(duì)SGC-7901細(xì)胞生長(zhǎng)有明顯抑制作用,并且隨著濃度的增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)而增強(qiáng),思他寧濃度為10-6mol/L的抑制率最大,約為61.76%;根據(jù)流式細(xì)胞儀定量分析顯示,濃度為10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mo
3、l/L的思他寧誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞產(chǎn)生的凋亡率分別為15.23%、26.3%、51.27%,與對(duì)照組2.28%的凋亡率比較均有顯著差異(P<0.05)。思他寧可誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞G0/G1,期阻滯,使處于S期的腫瘤細(xì)胞逐漸減少,且隨著濃度增加作用增強(qiáng);免疫細(xì)胞化學(xué)(SP)結(jié)果顯示,隨著不同濃度的思他寧處理48小時(shí)后,SGC-7901細(xì)胞表達(dá)棕黃色顆粒的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少,染色逐漸變淡。而對(duì)照組細(xì)胞的VEGF和NFκB蛋白高表達(dá),胞
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