Survivin相關(guān)凋亡因子在正常、增生子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜癌中的表達及意義.pdf

1、研究背景：子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一。子宮內(nèi)膜癌有兩種不同的病理類型，Ⅰ型為子宮內(nèi)膜樣癌(約占80％)，Ⅱ型為非子宮內(nèi)膜樣癌(約占20％)，前者通常由復(fù)雜型不典型增生發(fā)展而來，與雌激素刺激有關(guān)，因此子宮內(nèi)膜增生和子宮內(nèi)膜樣癌被認為是疾病連續(xù)的不同階段。細胞凋亡是指由細胞內(nèi)特定基因控制的程序性細胞主動死亡過程，細胞凋亡受抑會使腫瘤細胞生存期延長，是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要機制之一。凋亡在正常子宮內(nèi)膜及子宮內(nèi)膜癌變中起著非常重要

2、的作用。Survivin是新近發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白家族的成員，它特異性地在惡性腫瘤中表達。體外研究顯示它能夠抑制細胞死亡的效應(yīng)蛋白Caspase-3、Caspase-7，能直接或間接地抑制Bax、Fas誘發(fā)的內(nèi)源性及外源性細胞凋亡，因此它可能在在子宮內(nèi)膜癌變過程中發(fā)揮軸心的作用。然而，Survivin及其相關(guān)凋亡因子在子宮內(nèi)膜癌中的意義與關(guān)系仍未闡明。 目的：本實驗設(shè)計旨在探討Survivin由正常子宮內(nèi)膜經(jīng)增生發(fā)展到子宮內(nèi)膜樣癌

3、過程中的變化以及其在凋亡通路中與Caspase-3、Fas、Bax、Bcl-2等相關(guān)凋亡因子可能存在的關(guān)系，同時通過分析各凋亡因子與臨床病理因素之間的關(guān)系，以尋求可能影響子宮內(nèi)膜癌生物學(xué)行為及預(yù)后的相關(guān)因素。 材料和方法：選取2001年2月～2005年4月本教研室子宮內(nèi)膜癌77例，并隨機選取增殖期子宮內(nèi)膜9例、分泌期子宮內(nèi)膜9例、簡單型子宮內(nèi)膜增生16例、復(fù)雜型子宮內(nèi)膜增生21例、不典型增生13例，制作成組織芯片，利用原位凋亡標

4、記(TUNEL)的技術(shù)檢測不同類型子宮內(nèi)膜組織中發(fā)生的凋亡，同時應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測Survivin、Caspase-3、Fas、Bax、Bcl-2等的表達。收集了新鮮子宮內(nèi)膜標本包括正常子宮內(nèi)膜6例、子宮內(nèi)膜增生5例、子宮內(nèi)膜癌4例，采用半定量RT-PCR技術(shù)檢測SurvivinmRNA在不同類型子宮內(nèi)膜組織中的表達。 結(jié)果：1.TUNEL結(jié)果顯示，在正常周期的子宮內(nèi)膜中腺上皮細胞的凋亡是少見的。從簡單型增生、復(fù)雜型增生到

5、不典型增生凋亡指數(shù)AI呈上升趨勢，在子宮內(nèi)膜癌中AI顯著升高(P＜0.05)，但簡單型增生與復(fù)雜型增生的AI無顯著差異。在子宮內(nèi)膜癌中，AI的增高與組織分化有關(guān)，G3期比G1、G2凋亡率更高。 2.Survivin表達的陽性率及RS評分從簡單型增生、復(fù)雜型增生、不典型增生到子宮內(nèi)膜癌呈遞增趨勢，但在簡單型增生與復(fù)雜型增生中的表達無顯著差異。在子宮內(nèi)膜癌中其陽性率為79.2％，并且與組織學(xué)分級、手術(shù)分期呈正相關(guān)，但與肌層浸潤深度及

6、AI無顯著的相關(guān)性。 3.Bcl-2在正常子宮內(nèi)膜中的表達呈周期變化，在增殖期變強，而在分泌期變?nèi)?P＜0.05)。在簡單型增生與復(fù)雜型增生中Bcl-2的表達無顯著差異。在不典型增生與子宮內(nèi)膜癌中Bcl-2的表達下降。在子宮內(nèi)膜癌中Bcl-2的陽性率為58.4％，并且與組織學(xué)分級和肌層浸潤深度呈負相關(guān)(P＜0.05)，但與手術(shù)分期和AI無顯著的相關(guān)性。 4.Fas和Caspase-3的表達的陽性率及RS評分從正常子宮內(nèi)膜

7、到子宮內(nèi)膜癌呈上升趨勢，但在簡單型增生與復(fù)雜型增生中的表達無顯著差異。在子宮內(nèi)膜癌中Fas和Caspase-3的陽性率分別是83.1％、97.4％。我們觀察到，F(xiàn)as和Caspase-3在Ⅲ級子宮內(nèi)膜癌中表達下降。Fas的表達與AI呈正相關(guān)。但Fas和Caspase-3的表達與組織學(xué)分級、肌層浸潤深度、手術(shù)分期均無顯著的相關(guān)性。 5.Bax表達的陽性率及RS評分從正常子宮內(nèi)膜到不典型增生呈上升趨勢，但在子宮內(nèi)膜癌中的表達下降，并

8、且在簡單型增生與復(fù)雜型增生中Bax的表達無顯著差異。Bax在各型子宮內(nèi)膜增生的陽性率均為100％，而在子宮內(nèi)膜癌中陽性率為80.5％。隨著組織學(xué)分級的升高、肌層浸潤深度的增加Bax的表達呈下降趨勢(P＜0.05)，但Bax的表達與手術(shù)分期和AI無顯著的相關(guān)性。 6.RT-PCR結(jié)果顯示，Survivin的mRNA含量在正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜增生、子宮內(nèi)膜癌間存在顯著差異，并呈遞增趨勢。 7.相關(guān)分析顯示，Survivin

9、與Caspase-3、外源性凋亡相關(guān)因子Fas、內(nèi)源性相關(guān)凋亡因子Bax、Bcl-2間均無明顯的相關(guān)性。 結(jié)論：1.對正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜增生及子宮內(nèi)膜癌的凋亡指數(shù)分析表明，他們呈現(xiàn)線性變化。子宮內(nèi)膜簡單型增生與復(fù)雜型增生可能是宮內(nèi)膜惡性轉(zhuǎn)變的早期階段，機體通過凋亡拮抗內(nèi)膜的過度增生；不典型增生是癌變的過渡階段，凋亡指數(shù)逐級提高。子宮內(nèi)膜癌時調(diào)亡的意義可能是對不同生長潛能的細胞亞群進行克隆選擇。 2.Survivin對

10、凋亡的抑制在子宮內(nèi)膜惡性轉(zhuǎn)化起重要作用，其在子宮內(nèi)膜癌過表達，并與組織學(xué)分級、手術(shù)分期呈正相關(guān)，可作為評估子宮內(nèi)膜癌惡性生物學(xué)行為的可靠指標。 3.在高級別的子宮內(nèi)膜癌中Survivin的強表達、Fas、Bax、Caspase-3、Bcl-2表達的下降，其意義可能有利于高增殖潛能的腫瘤細胞亞群存活，加速腫瘤演進。然而Fas、Survivin、Bax及Bcl-2可能通過不同的凋亡途徑參與子宮內(nèi)膜癌的進展。 4.在子宮內(nèi)膜癌