HMGB1、TopBP1在膀胱癌中的表達及臨床意義.pdf

1、腫瘤的發(fā)生與發(fā)展足一人十分復雜的過程，當前眾多研究表明，腫瘤的生物學行為是出細胞內(nèi)單個或多個基因的改變決定的，癌基因的激活和抗痛基因的失活是正常細胞轉(zhuǎn)化成癌細胞的主要原因，因此，對腫瘤的分子遺傳學研究小僅有助于腫瘤的診斷及預后判斷，而且對腫瘤發(fā)病機制及腫瘤基因的研究均有著重要的指導意義。盡管此方面的研究尚處于初期，但從已有研究中已獲得了某些啟示。如膀胱癌的發(fā)生是多因素共同作用的結(jié)果，且近年來的研究表明，膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展、及其惡性行為均

2、與其遺傳上的分子生物學改變，也即基因表達改變，以及由此引起的蛋白表達及功能改變有密切關(guān)系。目前，研究焦點則是膀胱正常移行細胞與膀胱移行細胞癌細胞間的基因差異表達；差異表達基因在膀胱癌發(fā)生、發(fā)展中所發(fā)揮的作用以及作用機制；差異表達基因與膀胱癌分期、分級、復發(fā)以及預后的相關(guān)性，即它們在膀胱癌演進過程中所起的分子生物學特性改變。 本課題旨在研究人正常膀胱移行上皮細胞與膀胱移行細胞癌之間的差異表達基因，確定其與膀胱移行細胞癌生物學行為之

3、間的關(guān)系。在前期研究中，聯(lián)合LCM、RNA Amplification、DDRT-PCR技術(shù)，確定50個在膀胱移行細胞癌細胞與膀胱正常移行細胞中呈現(xiàn)表達差異的基因片段。本課題選取其中6條差異表達基因條帶進行研究。 第一部分膀胱癌與膀胱移形細胞差異表達基因研究 目的：明確差異表達基因為膀胱癌相關(guān)基因。 方法： (1)差異表達基因條帶克隆、測序。 (2)測序結(jié)果于Genebank進行檢索以及同源性分析

4、。 (3)Ouantitative real-time PcR檢測差異基因相對表達強度。 結(jié)論： (1)從基因水平確定HMGBl，TopBPl為膀胱癌相關(guān)基因。 (2)推斷BC2、3、4、5可能是新的腫瘤及膀胱癌相關(guān)基因。 第二部分HMGBl、TopBPl蛋白在膀胱癌表達水平研究 目的： (1)明確HMGBl、1bpBPl基因相應蛋白在膀胱癌與正常膀胱移行細胞間是否存在相應的表達水

5、平差異，進而從蛋白水平確定此二種基因為腫瘤及/或膀胱癌相關(guān)基因。 (2)明確此二種蛋白與膀胱移行細胞癌分級、浸潤程度的相關(guān)性，從而確定差異基因所表達蛋白與膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展的可能相關(guān)性。 方法：應用組織芯片免疫組化技術(shù)，檢測HMGBl、TbpBPl在膀胱移行細胞(30例)、膀胱移行細胞癌Ⅰ級(30例)、膀胱移行細胞癌Ⅱ級(30例)、膀胱移行細胞癌Ⅲ級(30例)中的表達，并分析其表達水平與癌細胞分級、浸潤深度的相關(guān)性。