Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白基因沉默對帕金森病模型鼠黑質(zhì)凋亡相關(guān)蛋白的影響.pdf

1、F a s 相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白基因沉默對帕金森病模型鼠黑質(zhì)凋亡相關(guān)蛋白的影響摘要。目的：探討F a s 相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白( F A D D ) 基因沉默對帕金森病( P D ) 大鼠行為學(xué)變化及黑質(zhì)死亡受體( F a s ) 和半胱氨酸蛋白酶8 ( C a s p a s e 一8 ) 表達(dá)的影響。方法：應(yīng)用化學(xué)修飾的干擾R N A 及立體定向技術(shù)等，在制作P D 模型前黑質(zhì)內(nèi)注入F A D Ds i R N A 、F A D Ds

2、i R N A 陽性對照物或F A D Ds i R N A 陰性對照物。觀察正常對照組、P D 組、F A D D s i R N A 組、F A D Ds i R N A 陽性對照組和F A D Ds i R N A 陰性對照組( 每組各1 5 只) 大鼠阿樸嗎啡誘導(dǎo)的旋轉(zhuǎn)行為的改變；采用W e s t e r n 印跡分析和R T —P C R 等方法，檢測以上5 組大鼠黑質(zhì)F A D D 、F a s 和C a s p a s

3、e 一8 蛋白及m R N A 的半定量表達(dá)。結(jié)果：正常對照組大鼠阿樸嗎啡誘導(dǎo)下無旋轉(zhuǎn)行為，其余4 組旋轉(zhuǎn)次數(shù)超過6 r ／m i n( 持續(xù)3 0 m i n ) 的大鼠分別為1 2 ( 1 2 ／1 4 ) 、3 ( 3 ／1 3 ) 、4 ( 4 ／1 5 ) 、1 1 ( 1 1 ／1 4 ) ，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( Z 2 = 1 8 ．5 6 ，P = O ．0 0 0 ) ；與正常組比較，P D 組各個(gè)蛋白及m R

4、 N A 的表達(dá)均明顯升高；與P D 組比較，F(xiàn) A D D s i R N A 組F A D D 和C a s p a s e 一8 蛋白及m R N A 的表達(dá)受到明顯抑制，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但P D 組和陰性對照組間及其余3 組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與正常組比較，其余4 組F ．a(chǎn) s 蛋白及m R N A 的表達(dá)均明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但4 組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：死亡受體凋亡通路在P D 發(fā)病機(jī)制中起重要

5、作用，而F A D Ds i R N A 能夠有效抑制此通路，從而在一定程度上具有神經(jīng)保護(hù)作用。碩士研究生栗永生( 神經(jīng)病學(xué))指導(dǎo)教師 謝安木教授關(guān)鍵詞：F a s 相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白質(zhì)；基因沉默；帕金森?。杭?xì)胞凋亡目錄引。言?????????????????????????????????????????????1第l 章材料和方法???????????????????????????··31 ．1 實(shí)驗(yàn)對象和主要

6、材料?????????????????????????31 ．2 實(shí)驗(yàn)方法??????????????????????????????51 ．3 實(shí)驗(yàn)步驟??????????????????????????????61 ．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理????????????????·?????????????8第2 章結(jié)果?????????????????????????????????92 ．1 大鼠行為學(xué)改變??????????????

7、?????????????92 ．2 W e s t e r n 印跡法檢測?????????????????????????·92 ．3 R T —P C R 產(chǎn)物的半定量分析??????????????????????·1 02 ．4 附圖???????????????????????????????··1 1第3 章討論????????????????????????????????

8、3;l 3第4 章結(jié)論????????????????????????????????1 5參考文獻(xiàn)?????????????????????????????????··l 6綜述??????????????????????????????????????????????··19綜述參考文獻(xiàn)????????????????????????????????2 6攻讀學(xué)位期間的研究成果????????