DF噴霧劑的藥劑學(xué)研究.pdf

1、DF 噴霧劑是以中華三葉委陵菜等中藥組成，根據(jù)民間驗方制成的中藥液體噴霧劑。臨床上用于治療病毒性帶狀皰疹，具有清熱解毒，斂瘡止血的功效。本課題按照中藥新藥研究技術(shù)要求對該制劑的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、初步穩(wěn)定性進(jìn)行了系統(tǒng)的實驗研究，并對中華三葉委陵菜藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了初步研究。 一．制備工藝的研究 在提取工藝方面，以總浸出物收率以及君藥中華三葉委陵菜中活性鞣質(zhì)和有效成分兒茶素提取量為考察指標(biāo)，采用紫外分光光度法測定活性鞣質(zhì)

2、含量，HPLC法測定兒茶素含量，分別考察了溶劑、粒度、乙醇濃度、提取時間、提取溫度、料液比等單因素對提取效果的影響，并在此基礎(chǔ)上，利用L<,9>(3<'4>)正交試驗法分別對乙醇回流提取工藝與乙醇滲漉提取工藝的條件進(jìn)行了優(yōu)選。結(jié)果表明藥材提取的優(yōu)選條件為：將原藥材粉碎成8～10目粒度，補足1.5倍量的吸水量，加60％乙醇溶液100mL，浸泡24h，按溶劑10倍量，滲漉流速10mL·min<'-1>·kg<'-1>進(jìn)行滲漉提取。

3、制劑成型工藝方面，對制劑的乙醇濃度、矯味劑的種類與用量、增溶劑的種類與用量、輔料的加入方式和順序分別做了單因素考察，并在此基礎(chǔ)上，利用紫外分光光度法測定活性鞣質(zhì)含量，HPLC法測定兒茶素含量，以外觀與含量相結(jié)合的綜合指標(biāo)，采用L<,9>(3<'4>)正交試驗法，考察了乙醇濃度，薄荷腦用量，丙二醇用量3個主要影響因素，優(yōu)選出制劑成型工藝的條件。結(jié)果表明：以5％的丙二醇碾融2‰的薄荷腦，用低濃度的乙醇溶液溶解后，加入藥材滲漉液中混勻，調(diào)節(jié)含

4、醇量為50％，藥材：藥液=1:12所制成品各項指標(biāo)均理想。 二．制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 采用薄層層析法對制劑中兒茶素、沒食子酸、薄荷腦分別進(jìn)行了鑒別，結(jié)果斑點分離效果好、陰性對照無干擾，圖譜清晰；應(yīng)用藥典方法分別對制劑的相對密度、pH值、含醇量、裝量差異、噴射試驗進(jìn)行了檢查，結(jié)果表明：制劑相對密度應(yīng)在0.94～0.95之間，pH應(yīng)在4.5～5.5之間，每瓶噴出總量不得少于26.00g，每10欽的噴射量應(yīng)在1.31g～1.60g

5、之間；在樣品含量測定純化工藝研究的基礎(chǔ)上，采用干酪素法測定制劑中鞣質(zhì)含量，檢測波長760nm；采用HPLC法測定制劑中兒茶素含量，色譜條件：色譜柱：Agilent Zorbax SB-C18(4.6×250mm，5μm)，流動相：甲醇-水-冰醋酸(15:81:1)，流速=0.9mL/min，柱溫30℃，檢測波長278nm；采用Gc法測定制劑中乙醇與丙二醇含量，色譜條件：色譜柱：DB-WAX毛細(xì)管柱(30m×0.319mm×0.25μm)

6、，進(jìn)樣口溫度：240℃，檢測器溫度為240℃，不分流，程序升溫：柱初溫45℃，保持4.5min，以每分鐘10℃升溫至200℃，保持3min；采用Gc法測定制劑中薄荷腦含量，色譜條件：色譜柱：DB-WAX毛細(xì)管柱(30m×0.319mm×0.25μm)，進(jìn)樣口溫度為225℃，檢測器溫度為240℃，不分流，程序升溫：柱初溫100℃，保持1min，以每分鐘5℃速率升至160℃，保持1min。測定結(jié)果表明：鞣質(zhì)的濃度線性范圍為0.928μg～4

7、.640μg；兒茶素的濃度線性范圍為0.64μg～3.20μg，12h內(nèi)穩(wěn)定性RSD=3.21％；乙醇的濃度線性范圍為1.58×10<'-2>μg～4.74×10<'-2>μg，丙二醇的濃度線性范圍為1.608×10<'-3>μg～4.824×10<'-3>μg，薄荷腦的濃度線性范圍為0.02μg～0.2μg，24h內(nèi)穩(wěn)定性RSD=1.72％；以上方法精密度的RSD值分別為0.70％、2.77％、0.60％、2.37％、1.77％；重復(fù)

8、性的RSD值分別為2.16％、1.73％、1.93％、1.32％、2.24％；在兒茶素、乙醇、丙二醇、薄荷腦含量測定中，平均回收率分別為99.00％、99.88％、101.99％、100.72％，RSD分別為1.40％、0.94％、1.93％、2.67％，以上所用定量方法準(zhǔn)確、簡便、可靠，可用于制劑中相應(yīng)成分的含量測定。 三．制劑初步穩(wěn)定性的研究 考察了制劑在自然貯存條件下的初步穩(wěn)定性。即將樣品制劑在臨床用包裝條件下，于

9、自然儲存條件進(jìn)行三個月的考察，每月均檢查質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中所列的全部項目。結(jié)果表明，除鞣質(zhì)和兒茶素含量逐月略有下降以外，其他檢查結(jié)果均符合規(guī)定。說明應(yīng)考慮向其中加入適宜的抗氧化劑，改進(jìn)處方組成，防止有效成分的氧化變質(zhì)。 四．中華三葉委陵菜藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 對君藥中華三葉委陵菜藥材中所含兒茶素與沒食子酸成分進(jìn)行了薄層色譜鑒別，結(jié)果表明，斑點分離效果好、陰性對照無干擾，方法專屬性強。對藥材中重金屬、砷鹽、灰分及酸不溶性灰分進(jìn)行了檢

10、查，并制定相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果表明：藥材重金屬含量小于20ppm，砷鹽含量小于2ppm，總灰分含量小于4％，且末檢測出酸不溶性灰分；采用干酪素法測定藥材中鞣質(zhì)含量，檢測波長760nm；采用HPLC法測定藥材中兒茶素含量，色譜條件：色譜柱：Agilent ZorbaxSB-C18(4.6×250mm，5μm)，流動相：甲醇-水-冰醋酸(15:81:1)，流速=0.9mL/min，柱溫30℃，檢測波長278nm；結(jié)果：鞣質(zhì)的濃度線性范圍為0

11、.928μg～4.640μg；兒茶素的濃度線性范圍為0.64μg～3.20μg，12h內(nèi)穩(wěn)定性RSD=2.48％，平均回收率為99.38％，RSD=1.05％，以上兩法的精密度RSD值分別為0.32％、1.14％，重復(fù)性RSD值分別為1.97％、1.92％，以上結(jié)果說明定量方法準(zhǔn)確、可靠，可用于藥材各成分含量的測定。此外，還采用HPLC法，檢測了6個不同批次中華三葉委陵菜藥材的HPLC色譜圖，在采集圖譜均滿足相關(guān)技術(shù)要求、方法學(xué)考察合格

12、的基礎(chǔ)上，分別進(jìn)行了個體樣本與樣本均值對照圖譜的比對與相關(guān)性分析，各樣品之間親緣距離的分析，以及利用SPSS10.1軟件對樣品進(jìn)行聚類分析，并得到聚類譜系圖。從結(jié)果可以看出恩施產(chǎn)3批藥材與達(dá)州產(chǎn)藥材親緣關(guān)系較近，而宣恩與利川產(chǎn)藥材作為另一類明顯區(qū)別于前者。對藥材指紋特征圖譜的研究，不僅反映了樣品整體的特征，同時還反映了樣品之間的親疏程度，為中華三葉委陵菜藥材各品種之間的質(zhì)量評價提供了一定理論參考。借助DF噴霧劑的研究，筆者對中藥液體噴霧