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1、目的:從視網(wǎng)膜的微環(huán)境入手,研究急性高眼壓對(duì)大鼠BRB的影響,探討急性高眼壓后大鼠BRB損傷的時(shí)空特征以及視網(wǎng)膜HIF-1α的表達(dá)與BRB損傷的關(guān)系。
方法:144只SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組大鼠制作高眼壓模型,實(shí)驗(yàn)對(duì)照組大鼠施行假手術(shù);之后分別存活3h、12h、1d、3d、7d。其中108只大鼠在處死前2小時(shí)大隱靜脈注射3%伊文思藍(lán)(EB),用共聚焦顯微鏡檢測(cè)視網(wǎng)膜鋪片和切片中EB的分布;用分
2、光光度計(jì)定量視網(wǎng)膜EB的含量。36只大鼠用免疫組化方法檢測(cè)視網(wǎng)膜HIF-1α的表達(dá)。
結(jié)果:在正常視網(wǎng)膜中偶見(jiàn)EB紅色熒光斑點(diǎn),在急性高眼壓后視網(wǎng)膜中可見(jiàn)EB紅色熒光斑點(diǎn)主要分布在節(jié)細(xì)胞層的毛細(xì)血管周邊,3h、12h和1d時(shí)EB紅色熒光斑點(diǎn)還見(jiàn)于內(nèi)核層的毛細(xì)血管周邊。視網(wǎng)膜中央部在3h時(shí)EB紅色熒光斑點(diǎn)開(kāi)始增多,12h時(shí)EB紅色熒光斑點(diǎn)最多,然后逐漸減少;視網(wǎng)膜周?chē)吭?h時(shí)EB紅色熒光斑點(diǎn)最多,然后逐漸減少;視網(wǎng)膜周?chē)?/p>
3、先于中央部出現(xiàn)EB滲漏高峰。進(jìn)一步定量檢測(cè)顯示和正常對(duì)照組相比,視網(wǎng)膜中央部在3h時(shí)EB滲漏量開(kāi)始增多,12h時(shí)EB滲漏量最多,以后逐漸減少,7d時(shí)接近恢復(fù)正常;視網(wǎng)膜周?chē)吭?h時(shí)EB滲漏量最多,以后逐漸減少,7d時(shí)接近恢復(fù)正常;視網(wǎng)膜周?chē)肯扔谥醒氩砍霈F(xiàn)EB滲漏量峰值。免疫組化結(jié)果顯示視網(wǎng)膜HIF-1α在正常對(duì)照組未見(jiàn)陽(yáng)性表達(dá),在HIOP后3h可見(jiàn)HIF-1α陽(yáng)性產(chǎn)物增多,12h時(shí)達(dá)高峰,然后1d、3d、7d逐漸減少;從視網(wǎng)膜中央部
4、和周?chē)縃IF-1α表達(dá)情況看,在3h和1d時(shí)視網(wǎng)膜周?chē)縃IF-1α陽(yáng)性產(chǎn)物明顯比中央部多;HIF-1α陽(yáng)性產(chǎn)物主要見(jiàn)于節(jié)細(xì)胞層,3h、12h時(shí)HIF-1α陽(yáng)性產(chǎn)物還見(jiàn)于內(nèi)核層。
結(jié)論:1.大鼠BRB在急性高眼壓后的早期損傷更明顯,晚期逐漸恢復(fù);視網(wǎng)膜周?chē)緽RB先于中央部出現(xiàn)嚴(yán)重破壞;BRB損傷主要分布于節(jié)細(xì)胞層。
2.急性高眼壓后HIF-1α的表達(dá)在早期明顯上調(diào),晚期逐漸恢復(fù),其表達(dá)的時(shí)空特征與BRB損
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