CK19與cyclinD1-CDK4、NF-κB在乳腺干細(xì)胞及其病變中的表達(dá)和相關(guān)性研究.pdf

1、目的： 干細(xì)胞是一類具有自我更新和多向分化潛能的特殊細(xì)胞。正常情況下，干細(xì)胞的自我更新和分化能力受到嚴(yán)格的調(diào)控，一旦這種機(jī)制被破壞，細(xì)胞就會無限制的生長、繁殖、形成異常新生物，即腫瘤。乳腺腫瘤雖然組織類型復(fù)雜，但其組織發(fā)生卻有其同源性，都來自于乳腺上皮干細(xì)胞。同時(shí)，乳腺癌干細(xì)胞作為第一個(gè)在實(shí)體瘤中被鑒定的腫瘤干細(xì)胞受到廣泛關(guān)注。 同其他器官一樣，乳腺干細(xì)胞也是多潛能的，可以產(chǎn)生各級祖細(xì)胞，并最終分化成肌上皮和導(dǎo)管上皮。雖

2、然乳腺組織中存在干細(xì)胞，但還是缺乏特異性的乳腺干細(xì)胞標(biāo)記物。乳腺中的細(xì)胞角蛋白的表達(dá)在某種程度上反應(yīng)了細(xì)胞的分化，角蛋白19（CK19）是在胚胎最早表達(dá)的角蛋白之一，常在乳腺末梢小管腺泡單位（Terminal Duct Lobular TDLU）的腺上皮細(xì)胞表達(dá)，在胎兒的乳腺中包含有CK19陽性的腺上皮細(xì)胞，目前被認(rèn)為是乳腺干細(xì)胞的標(biāo)志。 本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化檢測乳腺上皮干細(xì)胞標(biāo)記物CK19，轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和細(xì)胞周期素cycl

3、inD1及其依賴激酶CDK4在正常乳腺組織、乳腺增生癥及浸潤性導(dǎo)管癌中的表達(dá)，探討細(xì)胞周期在成人乳腺上皮干細(xì)胞分化和演變中的作用，揭示乳腺上皮干細(xì)胞分化及發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化時(shí)演變規(guī)律和機(jī)制。 方法： 1．采用免疫組化SP法分別檢測10例正常乳腺組織、17例乳腺增生癥、38例浸潤性乳腺癌中干細(xì)胞標(biāo)記物CK19的表達(dá)情況，探討CK19在乳腺干細(xì)胞及其病變的表達(dá)與分化的關(guān)系。 2．采用免疫組化SP法分別檢測細(xì)胞周期調(diào)控蛋白c

4、yclinD1和CDK4及核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB的表達(dá)情況，并對它們在乳腺正常組織、良性增生組織、乳腺腫瘤分化程度上的差異及它們各自之間的相關(guān)性進(jìn)行觀察總結(jié)。 結(jié)果： 1．CK19在乳腺正常組織、增生、浸潤癌組織中的表達(dá)逐漸增多，在此三種乳腺組織中的表達(dá)存在差異，P<0．05。乳腺組織中CK19陽性表達(dá)率為41．5%，低分化的乳腺癌CK19陽性表達(dá)率為100%，顯著高于高分化的乳腺癌（25．0%），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<

5、0．05）。浸潤型導(dǎo)管癌1級、2級和3級CK19陽性表達(dá)率分別為25．0%、50．0%、100%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）。 2．cyclinD1在正常乳腺組織無表達(dá)，乳腺增生病中陽性率為11．8%，38例乳腺癌中有14例表達(dá)，陽性率為47．4%，正常和增生組織與乳腺癌之間表達(dá)有明顯差異（P<0．05）。 3．CDK4在正常乳腺組織、乳腺增生性疾病和浸潤性導(dǎo)管癌中均有表達(dá)，其陽性率分別為10．0%、17．6%、4

6、5．9%，各組織類型之間的表達(dá)有顯著的差異（P<0．01）。 4．NF-κB在正常乳腺組織、乳腺增生性疾病、浸潤性導(dǎo)管癌中均有表達(dá)，其陽性率分別為20．0%、35．3%、66．0%，各組織類型之間存在差異性（P<0．05）。 5．經(jīng)Spearman相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)： 乳腺癌中CK19和cyclinD1的表達(dá)呈現(xiàn)正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0．535，P=0．038：乳腺癌中CK19和CDK4的表達(dá)呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0

7、．821，P=0．00乳腺癌中cyclinD1和NF-κB的表達(dá)呈顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0．671，P=0．00。 結(jié)論： 1．CK19在乳腺癌組織中的表達(dá)水平高于正常乳腺組織和乳腺增生病，進(jìn)一步證實(shí)了乳腺癌組織中可能存在具有自我更新和分化潛能的干細(xì)胞樣細(xì)胞的理論研究。 2．CK19在乳腺癌組織中表達(dá)與分化程度關(guān)系密切，提示CK19與乳腺癌惡性程度有關(guān)，可能是評估乳腺癌預(yù)后的重要生物學(xué)指標(biāo)之一。 3．C

8、yclinD1/CDK4在乳腺癌組織中的表達(dá)水平高于正常乳腺組織和乳腺增生病，CK19與cyclinD1/CDK4的表達(dá)陽性數(shù)相關(guān)性分析顯示，兩者呈正相關(guān)，提示細(xì)胞周期的紊亂是乳腺干細(xì)胞分化異常的重要原因。 4．CyclinD1/CDK4與NF-κB在各乳腺組織類型中的表達(dá)顯示，兩者呈顯著正相關(guān)，說明在乳腺干細(xì)胞癌變過程中，NF-κB的過表達(dá)可能促進(jìn)了cyclinD1/CDK4的表達(dá)，其機(jī)制可能是由于cyclinD1啟動(dòng)子含有N