柑橘果肉線粒體分離及果皮精油組分分析.pdf

1、作為柑橘生產(chǎn)大國(guó)，我國(guó)柑橘的主要栽培品種多以鮮食為主。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展，消費(fèi)者對(duì)柑橘果實(shí)的內(nèi)在與外觀品質(zhì)均提出了更高的要求。柑橘果實(shí)的內(nèi)在品質(zhì)主要包括:柑橘果實(shí)的風(fēng)味，營(yíng)養(yǎng)成分，糖酸的含量等;外觀品質(zhì)主要包括果實(shí)的形狀，果形指數(shù)，果實(shí)色澤等。果實(shí)采摘后，其自身的營(yíng)養(yǎng)供給立刻被切斷，果實(shí)衰老相關(guān)的一些生理、生化指標(biāo)發(fā)生顯著的改變，進(jìn)而導(dǎo)致柑橘果實(shí)品質(zhì)發(fā)生劣變。作為動(dòng)植物細(xì)胞中的一種重要的細(xì)胞器，線粒體直接參與細(xì)胞衰老。線粒體的形態(tài)和

2、生理狀態(tài)與柑橘果實(shí)采后生物學(xué)特性關(guān)系密切，但在柑橘果實(shí)中尚未開展系統(tǒng)的研究，因此，分離柑橘果肉組織的線粒體是深入開展果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)變化研究的重要前提條件。另一方面，油斑病(Oleocellosis)是柑橘采后一種十分常見的生理性病害，會(huì)嚴(yán)重降低果實(shí)的外觀品質(zhì)，但其發(fā)病機(jī)理尚不明確，通常認(rèn)為與果皮油胞破裂和精油外滲有關(guān)，但還缺乏實(shí)驗(yàn)證據(jù)的支持。為此，本研究分別以“國(guó)慶一號(hào)”溫州蜜柑（Citrus unshiu“Guoqing No.1”）和

3、伏令夏橙(Citrus sinensis Osbeck)為主要實(shí)驗(yàn)材料摸索果肉組織線粒體分離的技術(shù)體系，以溫州蜜柑、紐荷爾臍橙和早紅臍橙為研究材料，探究精油成分的差異與油斑病的關(guān)系。主要結(jié)果如下:
　　1、線粒體分離緩沖液的蔗糖濃度因品種不同而不同，溫州蜜柑最適合的蔗糖濃度為0.5 M，而夏橙為0.4 M。通過(guò)一次Nycodenz不連續(xù)密度梯度離心，線粒體出現(xiàn)在14％和21％的密度梯度界面處。線粒體分離產(chǎn)物Western Blot

4、分析結(jié)果表明，通過(guò)該方法分離的線粒體基本是完整的，基本不含有有色體，過(guò)氧化物酶體，細(xì)胞質(zhì)的污染，但是液泡的污染較嚴(yán)重。
　　2、針對(duì)溫州蜜柑、紐荷爾臍橙、早紅臍橙這三個(gè)品種柑橘四個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的精油成分進(jìn)行分析。不同時(shí)期之間和不同品種之間的比較結(jié)果表明，在早紅臍橙的四個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期中，γ-萜烯、異松油烯、β-芳樟醇、香茅醛、橙花醛、紫蘇醛、α-石竹烯在早紅臍橙轉(zhuǎn)色期顯著上調(diào)積累;而在轉(zhuǎn)色期的溫州蜜柑、紐荷爾臍橙、早紅臍橙精油中，香

5、檜烯，月桂烯，β-芳樟醇，橙花醛，香葉醛，β-蓽澄茄油烯，β-法呢烯，(Z，E)-α-法呢烯，1-辛醇，辛醛，壬醛，癸醛，十二醛在轉(zhuǎn)色期的早紅臍橙精油中顯著上調(diào)積累。
　　3、使用轉(zhuǎn)色期的早紅精油涂抹轉(zhuǎn)色前后的溫州蜜柑果面的結(jié)果表明，轉(zhuǎn)色前的溫州蜜柑對(duì)精油的敏感程度更高，具體表現(xiàn)在油斑病的病斑面積更大，褐變更嚴(yán)重。紫外燈照射油斑病病斑部位的結(jié)果也表明，油斑病病斑部位在紫外燈的照射下會(huì)顯現(xiàn)出黃色的熒光。冰凍切片的結(jié)果表明，油斑病發(fā)病