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文檔簡介
1、目的:通過建立動物損傷模型,采用甘肅省中醫(yī)院院內制劑-中藥通絡搽劑作為治療藥物,從分子生物學、組織形態(tài)學、病理學角度研究中藥通絡搽劑對大鼠閉合性軟組織損傷的修復作用,為該藥臨床治療急性閉合性軟組織損傷提供理論依據。本研究將得到一種具有藥物不良反應小、提高機體局部疼痛閾值、迅速修復受損軟組織的特點的創(chuàng)新藥物,為中藥現(xiàn)代化的發(fā)展提供新的佐證。
方法:本實驗取50只健康、成年清潔級大鼠,月齡2月,體重180~220g,雌雄各半。造模
2、方法參照邱桐等[1-3]動物閉合性軟組織損傷的實驗方法并且略加修改。隨機分為3組:通絡搽劑組、陽性藥物對照組、模型對照組,造模成功后1小時開始給藥,模型對照組不使用任何藥物。每日兩個相同時相點重復,用醫(yī)用橡膠手套切取寬約1cm的條帶綁扎患肢,以免大鼠舔舐實驗用藥,造模后按第一天、第三天、第五天三個時相,每組隨機取5只大鼠采集血液和損傷軟組織置入4%多聚甲醛溶液固定。本次實驗主要通過以下幾個方面來觀察治療軟組織損傷疾病的藥理作用。1)血液
3、使用ELISA法檢測炎癥因子白介素、前列腺素含量變化;2)軟組織使用HE染色和免疫組化檢測三組大鼠軟組織病理改變和新生血管內皮標志物JG12和Ki67的出現(xiàn)及分布情況;3)肉眼觀察并評定其損傷結果變化。
結果:1)大鼠經造模后通絡搽劑組、正骨水組、模型對照組三組血液中炎癥因子白介素IL-1和前列腺素PGE2濃度變化經用ELISA法檢測情況:模型組與通絡搽劑組比較在第5天時相點差異性顯著(P<0.05),說明中藥通絡搽劑治療閉合
4、性軟組織損傷在該指標上效果顯著;通絡搽劑組與正骨水組比較集中在第一、三次測量時相時無統(tǒng)計學意義(P>0.05),說明二者治療閉合性軟組織損傷在該指標方面無明顯差異性。模型對照組血清中PGE2和IL-1含量明顯高于通絡搽劑組和正骨水組;通絡搽劑組在損傷第1天、第3天、第5天均能明顯抑制損傷軟組織中PGE2和IL-1的升高,且與正骨水組比較,無顯著性差異;但通絡搽劑組和正骨水組跟模型對照組有顯著性差異。2)大鼠經造模后通絡搽劑組、正骨水組、
5、模型對照組三組損傷軟組織標本中用藥后的組織切片 HE染色情況顯示:在本實驗的造模情況下經過中藥通絡搽劑5天治療后局部損傷軟組織基本接近于正常組織。3)大鼠經造模后通絡搽劑組、正骨水組、模型對照組三組損傷軟組織標本中用藥后的組織切片以SABC法免疫組化染色進一步觀察微血管的增生,①在通絡搽劑組中有表達,在正骨水組和模型對照組中接近于無表達;4)肉眼觀察結果損傷征候指數觀察見通絡搽劑組和正骨水組均能促進損傷局部腫脹、皮下瘀斑和皮下出血的消散
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