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文檔簡介
1、目的: 1.研制出納米級的四氧化三鐵并研究其在動物體內(nèi)的藥物動力學(xué)、體內(nèi)臟器的分布和排泄。 2.用最佳的方法制備出納米級磁性多柔比星脂質(zhì)體并對其外部形態(tài)特征、粒徑大小、磁響應(yīng)性和藥物包封率進(jìn)行檢測。 3.選擇四氮唑鹽比色法(MTT法)和體外克隆形成法研究磁性多柔比星納米脂質(zhì)體對人大腸癌細(xì)胞的體外細(xì)胞毒作用。 方法: 1.自行設(shè)計用共沉淀法制備出納米級四氧化三鐵并進(jìn)行形態(tài)學(xué)檢測及磁性檢測。將納米級四
2、氧化三鐵靜脈注射到動物體內(nèi),用原子吸收光譜法測量血清中鐵的濃度,將血藥濃度—時間數(shù)據(jù)用3P87藥學(xué)程序進(jìn)行擬合,計算出藥物動力學(xué)的各個參數(shù)。另將本品注入動物體內(nèi),按設(shè)定的時間處死動物后用原子吸收光譜法測量不同臟器中的鐵含量。將四氧化三鐵磁液靜脈注射到動物體內(nèi),分別收集給藥前48小時和給藥后48小時內(nèi)的尿液和糞便,測量其中的鐵含量。 2.自行設(shè)計用反相蒸發(fā)法制備出納米級磁性多柔比星脂質(zhì)體,以正交實驗設(shè)計在蒸發(fā)前對溶劑超聲粉碎、多柔
3、比星的濃度、蒸發(fā)后對混合液超聲和脂水相比例在四因素三水平的基礎(chǔ)上確定最佳包封率的制備工藝。用原子粒電鏡觀察其外部形態(tài)特征;用Zetapal無機(jī)粒度分析儀測量其粒徑分布;利用紫外—SephadexG-50法測定其包封率,利用磁測儀測量其磁響應(yīng)性。v3.利用自行研制的磁性多柔比星納米脂質(zhì)體,以體外培養(yǎng)的人大腸癌細(xì)胞為研究對象,采用四氮唑鹽比色法(MTT法),觀察多柔比星、多柔比星脂質(zhì)體和磁性多柔比星納米脂質(zhì)體在有磁場和沒有磁場作用條件下濃度
4、和作用時間對細(xì)胞生長規(guī)律的影響。利用體外克隆形成法在自行設(shè)計的循環(huán)裝置下進(jìn)行磁性多柔比星脂質(zhì)體的磁響應(yīng)性研究和對大腸癌細(xì)胞的殺傷率研究。 結(jié)果: 1.制備的納米級四氧化三鐵平均粒徑為10nm,磁響應(yīng)性高。動物靜脈注射四氧化三鐵后呈雙室模型代謝。四氧化三鐵在動物體內(nèi)主要分布在肝臟和脾臟等網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞和吞噬細(xì)胞較多的臟器,并且在排泄緩慢。 2.磁性多柔比星脂質(zhì)體最佳工藝為蒸發(fā)前不進(jìn)行超聲粉碎、多柔比星的濃度為0.5m
5、g/ml、脂水相比為1:1.5和蒸發(fā)后進(jìn)行超聲粉碎20min,制作出的脂質(zhì)體包封率最高,在電鏡下為圓形或橢圓形,平均粒徑為293.4nm±20.6,包封率為30.8%±3.27,磁響應(yīng)性50.28emu。 3.在無磁場作用下多柔比星、多柔比星脂質(zhì)體和磁性多柔比星納米脂質(zhì)體對人大腸癌細(xì)胞生長抑制無明顯差異。外加磁場的作用下磁性多柔比星納米脂質(zhì)體對人大腸癌細(xì)胞生長抑制與多柔比星和多柔比星脂質(zhì)體有明顯差異。在磁場循環(huán)裝置下可見磁性多柔
6、比星脂質(zhì)體有較好的磁場響應(yīng)性,磁場作用下磁性多柔比星脂質(zhì)體對大腸癌細(xì)胞的殺傷率高于沒有磁場作用的殺傷率。 討論: 1.Fe3O4超微顆粒呈黑色顆粒,顆粒尺寸大約為10nm,粒度分布比較均勻,并且分散得非常好。在動物體內(nèi)靜脈注射本品后呈雙室模型代謝;四氧化三鐵在動物體內(nèi)的分布依次為:肝臟、脾臟、心臟和腎臟,主要是肝臟和脾臟等網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞和吞噬細(xì)胞較多的臟器;四氧化三鐵在體內(nèi)排泄緩慢,可以從糞便和尿液排出體外。 2.
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